elisa檢測(cè)試劑盒在這一進(jìn)程中,，一般狀況下有三次加樣,，它們分別是加標(biāo)本,，加酶物，加底物,。凍住血清融解后,，蛋白質(zhì)部分濃縮，散布不均,，應(yīng)充沛混勻宜輕緩,，防止氣泡，可上下倒置混和,，不要在混勻器上強(qiáng)烈振動(dòng),。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只需待血清天然凝聚,、縮短后即可獲得,。也可在板孔中參加稀釋液，再在其參加血清標(biāo)本,，然后在微型顫動(dòng)器上顫動(dòng)1分鐘以確?；旌汀Ｒ话阏f來,，在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,，逾越一星期測(cè)定的需低溫冰存。

ELISA試劑盒包被條件的優(yōu)化：
1,、包被液的挑選：一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液,，假設(shè)包被的抗原在堿性條件下不穩(wěn)定的話，也可以運(yùn)用pH7.2的磷酸鹽緩沖液,。
2,、包被濃度的挑選：包被的zui適濃度隨固相載體和包被物的性質(zhì)改動(dòng)，一般蛋白質(zhì)的包被濃度為1-5ug/ml,，要明晰關(guān)于特定包被抗原的zui適包被濃度需求通過實(shí)驗(yàn)來斷定,。
3、包被溫度的挑選：一般是4-8度條件下放置一個(gè)黑夜或許37度保溫2小時(shí),，咱們強(qiáng)烈建議4-8度條件下包被,，有利于蛋白活性的堅(jiān)持。
4,、包被抗原的挑選：可分為天然蛋白,、重組蛋白和小分子抗原三大類。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有機(jī)化合物,，因?yàn)榉肿恿刻?，一般難于直接吸附在酶標(biāo)板上,，一般都先使其與無關(guān)蛋白質(zhì),，比如BSA等偶聯(lián)，偶聯(lián)物吸附于固相載體上。