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近來的趙老師在操作小鼠elisa檢測試劑盒實驗的時分發(fā)現(xiàn)了一個問題,,所以來電我公司的售后部分問道:加完顯色液(購買)顯色必定時刻后,,再加停止液(2M H2SO4,,自己)后,,當即測驗其吸光度值,,等過幾分鐘再測驗吸光度值,,發(fā)現(xiàn)兩次測得的吸光度值發(fā)作衰減,。第2次均小于*次。而且,,加停止液時,,從*條加到第12條后,測驗發(fā)現(xiàn),,吸光度值從1-12條逐級衰減,。條件是這12條酶標板都是同一種產(chǎn)品,而且包被相同蛋白,。
ELISA試劑盒通過我公司技能專員的剖析,,本來ELISA吸光度值衰減能夠這樣奇妙應對。
其實詳細的原因也很簡單,,有可能是顯色液的質(zhì)量不夠好,。一般情況下,停止反響后OD值的下降前期不是很明顯,。停止后,,吸光度值是會跟著時刻衰減,所以一般是加完停止液后當即測,,這樣比較準,。再次剖析12條顯示逐級遞減的原因看看是否是:
① 顯色時刻調(diào)整,如果你現(xiàn)在的顯色時刻是10MIN,,那調(diào)整到30MIN,,再加停止液,觀察上述現(xiàn)象是否出現(xiàn)。
② 停止液中加入少量甘油看下怎么樣,。建議您運用RD品牌的ELISA試劑盒,,顯色時刻是30分鐘,停止后要求在30分鐘內(nèi)檢測,,加入停止液后,,在加入停止液后2到3分終內(nèi)檢測,,這是OD值相對比較高。擬合值能達到四個9,。
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