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近來(lái)的趙老師在操作小鼠elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)的時(shí)分發(fā)現(xiàn)了一個(gè)問(wèn)題,所以來(lái)電我公司的售后部分問(wèn)道:加完顯色液(購(gòu)買)顯色必定時(shí)刻后,再加停止液(2M H2SO4,,自己)后,當(dāng)即測(cè)驗(yàn)其吸光度值,等過(guò)幾分鐘再測(cè)驗(yàn)吸光度值,,發(fā)現(xiàn)兩次測(cè)得的吸光度值發(fā)作衰減。第2次均小于*次,。而且,,加停止液時(shí),從*條加到第12條后,,測(cè)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),,吸光度值從1-12條逐級(jí)衰減。條件是這12條酶標(biāo)板都是同一種產(chǎn)品,,而且包被相同蛋白,。
ELISA試劑盒通過(guò)我公司技能專員的剖析,本來(lái)ELISA吸光度值衰減能夠這樣奇妙應(yīng)對(duì),。
其實(shí)詳細(xì)的原因也很簡(jiǎn)單,,有可能是顯色液的質(zhì)量不夠好。一般情況下,,停止反響后OD值的下降前期不是很明顯,。停止后,吸光度值是會(huì)跟著時(shí)刻衰減,,所以一般是加完停止液后當(dāng)即測(cè),,這樣比較準(zhǔn)。再次剖析12條顯示逐級(jí)遞減的原因看看是否是:
① 顯色時(shí)刻調(diào)整,,如果你現(xiàn)在的顯色時(shí)刻是10MIN,,那調(diào)整到30MIN,再加停止液,觀察上述現(xiàn)象是否出現(xiàn),。
② 停止液中加入少量甘油看下怎么樣,。建議您運(yùn)用RD品牌的ELISA試劑盒,顯色時(shí)刻是30分鐘,,停止后要求在30分鐘內(nèi)檢測(cè),,加入停止液后,在加入停止液后2到3分終內(nèi)檢測(cè),這是OD值相對(duì)比較高,。擬合值能達(dá)到四個(gè)9,。
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