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產(chǎn)品名稱(chēng):脂質(zhì)過(guò)氧化物(LPO)微量法測(cè)試盒
規(guī)格 : 100管/96樣
測(cè)試方法: 微量法
貨號(hào):GOY-01S6412
分類(lèi):氧化與抗氧化系列
商品介紹:
脂質(zhì)過(guò)氧化是動(dòng)植物體內(nèi)活性氧(ROS)氧化生物膜的過(guò)程,脂質(zhì)過(guò)氧化物(LPO)是脂質(zhì)過(guò)氧化過(guò)程的產(chǎn)物,,即ROS與生物膜的磷脂,、酶和膜受體相關(guān)的多不飽和脂肪酸的側(cè)鏈及核酸等大分子物質(zhì)起脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)形成LPO,使細(xì)胞膜的流動(dòng)性和通透性發(fā)生改變,最終導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的改變,。因此,,LPO常被作為機(jī)體氧化應(yīng)激的一種指標(biāo),與某些疾病的病理過(guò)程,,如腫瘤,、化學(xué)中毒、感染,、炎 癥,、自身免疫疾病、動(dòng)脈粥樣硬化(AS)及心腦血管疾病,,以及衰老等生理過(guò)程密切相關(guān),。
測(cè)定原理:
LPO在酸性條件下加熱,產(chǎn)生小分子終產(chǎn)物MDA,,MDA(thiobarbituric acid,,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,,在535nm有最大吸收峰。
需自備的儀器和用品:
分光光度計(jì),、水浴鍋,、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器,、1mL玻璃比色皿,、研缽、冰和蒸餾水,。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,,4℃保存,。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存,;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,,-20℃保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存,;
試劑四:液體50mL×1瓶,, 4℃保存;
測(cè)定步驟
1,、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零,。
2,、 將試劑一、二,、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘,。
3、 加樣表:
![圖1.jpg 圖1.jpg](https://img73.chem17.com/6fd5d5abffebbb9ee0327440cf20a8dab186447dc68a808d252c21a82ebd76a4b3072d0fa48baf1e.jpg)
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱(chēng)取約0.1g樣本,,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,,200W,,破碎3s,間歇7s,,總時(shí)間1min),,然后4℃,8000g離心10min,,取上清測(cè)定,。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),,冰浴勻漿后于4℃,,200g離心5min,棄沉淀,,取上清在4℃,,8000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,,取沉淀加1mL提取液二,,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,,200W,破碎3s,,間歇7s,,總時(shí)間1min),然后4℃,,8000g離心10min,,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性,,按照步驟①提取粗酶液,,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液,。
一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 中 pH)30 次 IPTG 干粉2.5g
一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 低 pH)30 次 Ionomycin( 鈣離子載體 )250nmol
高 pH 緩沖液套裝30 次 Insulin18mg
中 pH 緩沖液套裝30 次 Indo-1,,五銨鹽1mg
低 pH 緩沖液套裝30 次 Indo-1 AM1mg
Fura-2 AM( 鈣離子熒光探針 )1mg DNA PAGE 膠回收試劑盒30 次
Fura-2,五銨鹽1mg DNA PAGE 膠回收試劑盒100 次
Golgi-Tracker Red( 高爾基體紅色熒光探針 )1mg DNA 5’末端標(biāo)記試劑盒10 次
Hydroxystilbamidine 10mg DMSO,,PCR 級(jí)1.5mL
Indo-1 AM1mg dITP 溶液,,2.5mM2mL
大鼠V-Rel網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病毒癌基因同源物A(RELA)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠WAP四二硫化物核心域蛋白1(WFDC1)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠Wolfram綜合征蛋白1(WFS1)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠YY肽(PYY)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠α1-抗(α1AT)elisa檢測(cè)試劑盒
脂質(zhì)過(guò)氧化物(LPO)微量法測(cè)試盒血液 DNAout150 次 一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 高 pH)30 次
柱式血液 DNAout50 次 一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 低 pH)30 次
柱式血液 DNAout200 次 一站式大提柱式 miRNAout5次
磁珠血液 DNAout50 次 一站式磁珠法植物 mRNAout50 次
柱式血液 DNA-RNAout50 次 一站式磁珠法真菌 mRNA 提取試劑盒50 次
FBP活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位,。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),,6.22×103 L / mol /cm,;d:比色皿光徑,1cm,;V樣:加入樣本體積,0.1 mL,;V樣總:加入提取液體積,,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,,5 min,;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL,;W:樣本質(zhì)量,,g。