商品介紹：
銅藍(lán)蛋白是血漿的含銅蛋白，有運(yùn)輸銅的功能,，同時(shí)具有氧化酶的活性，是細(xì)胞外液重要的抗氧化劑,。

測(cè)定原理：

銅藍(lán)蛋白催化3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺生成藍(lán)色產(chǎn)物,，在645nm處有特征吸收峰，依此可得銅藍(lán)蛋白活性,。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:

天平,、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板和蒸餾水,。

產(chǎn)品名稱：銅藍(lán)蛋白可見(jiàn)分光光度法測(cè)試盒
規(guī)格 : 50管/24樣
測(cè)試方法: 可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào)：GOY-01S6435
分類：氧化與抗氧化系列

試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶,，4℃保存。
提取液二：液體50mL×1瓶,，4℃保存,。
試劑一：粉劑×1瓶，-20℃保存,；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,，用不完的試劑4℃保存,；
試劑二：液體18μL×1瓶，4℃保存,；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存,；
試劑三：粉劑×1瓶,，-20℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,，用不完的試劑4℃保存,；
試劑四：液體50mL×1瓶， 4℃保存,；
測(cè)定步驟
1,、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,，蒸餾水調(diào)零,。
2、 將試劑一,、二,、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3,、 加樣表：

樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一,，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴,，200W，破碎3s,，間歇7s,，總時(shí)間1min），然后4℃,，8000g離心10min,，取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱取約0.1g樣本,，加入1mL提取液一）,，冰浴勻漿后于4℃，200g離心5min,，棄沉淀,，取上清在4℃，8000g離心10min,，取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,，取沉淀加1mL提取液二,，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴，200W,，破碎3s,，間歇7s，總時(shí)間1min）,，然后4℃,，8000g離心10min，取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性,。
建議測(cè)定總FBP酶活性,，按照步驟①提取粗酶液，若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,，則按照步驟②提取粗酶液,。
FBP活性計(jì)算：
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位,。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積,，1×10-3 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù),，6.22×103 L / mol /cm,；d：比色皿光徑，1cm,；V樣：加入樣本體積,，0.1 mL；V樣總：加入提取液體積,，1mL,；T：反應(yīng)時(shí)間，5 min,；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL；W：樣本質(zhì)量,，g,。
【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè),。避免給您帶來(lái)不必要的損失,，請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說(shuō)明！
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