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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化試劑盒>>蛋白酶系列>> 肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)可見分光光度法
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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2022-03-14 16:25:12瀏覽次數(shù):756次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50管/48樣 |
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貨號(hào) | GOY-01S6663 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅用于科研 |
商品介紹:
肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶是存在于線粒體內(nèi)膜的一類酰基轉(zhuǎn)移酶,??赡娴卮呋瘡孽,;鶎Ⅴ;D(zhuǎn)移至L-肉毒堿的反應(yīng),,在轉(zhuǎn)運(yùn)脂肪酸通過線粒體內(nèi)膜的過程中起重要作用,。
測(cè)定原理:
基于肉堿和脂酰在丙二酰存在與否的條件下,通過肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CPT-I)的作用,,產(chǎn)生脂酰肉堿,,并釋放出巰基(COA-SH),與Ellman試劑DN-TB反應(yīng)后,,產(chǎn)生黃色的TNB,。通過其吸收峰值得變化(412nm),來定量分析CPT-1的活性,。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì),、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋,、可調(diào)式移液器,、1mL玻璃比色皿、研缽,、冰,、無水乙醇和蒸餾水
產(chǎn)品名稱:肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)可見分光光度法測(cè)試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測(cè)試方法: 可見分光光度法
貨號(hào):GOY-01S6663
分類:脂肪酸代謝系列
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存,。
提取液二:液體50mL×1瓶,,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,,-20℃保存,;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存,;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,,-20℃保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶,, 4℃保存,;
測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,,蒸餾水調(diào)零。
2,、 將試劑一,、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘,。
3,、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,,加入1mL提取液一,,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,,破碎3s,,間歇7s,總時(shí)間1min),,然后4℃,,8000g離心10min,取上清測(cè)定,。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,,200g離心5min,,棄沉淀,取上清在4℃,,8000g離心10min,,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,,200W,破碎3s,,間歇7s,,總時(shí)間1min),然后4℃,,8000g離心10min,,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性,。
建議測(cè)定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,,則按照步驟②提取粗酶液。
FBP活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位,。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位,。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L,;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,,1cm,;V樣:加入樣本體積,0.1 mL,;V樣總:加入提取液體積,,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,,5 min,;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL,;W:樣本質(zhì)量,,g。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,,不得用于人體臨床直接檢測(cè),。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說明,!
0酸化DDX58抗體 配子生成素結(jié)合蛋白1抗體
0酸化結(jié)蛋白抗體 配對(duì)盒同源基因4抗體
動(dòng)力相關(guān)蛋白1抗體 配對(duì)盒基因9抗體
Notch信號(hào)通路Delta樣配體4抗體 配對(duì)盒基因8抗體
溶酶體絲氨酸蛋白酶DPP2抗體 配對(duì)盒基因7抗體
含L谷氨酰胺,,不含酚紅
含L谷氨酰胺,含HEPES 500ml
含L谷氨酰胺,,含丙酮酸鈉 500ml
含L谷氨酰胺,,含丙酮酸鈉,含HEPES
含L谷氨酰胺,,含酚紅
肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)可見分光光度法測(cè)試盒大腸埃希氏菌(大腸桿菌) 燼灰鏈霉菌 Micromonospora cinereogriseus
玫瑰紅瓊脂培養(yǎng)基70mm 淺玫瑰小單孢菌 Micromonospora roseolus
球毛殼 胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基200ml/瓶
枯草芽孢桿菌 多頭霉
硫乙醇酸鹽平板培養(yǎng)基70mm 金針菇
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