詳細(xì)介紹
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,,不得用于人體臨床直接檢測(cè),。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購買說明,!
產(chǎn)品名稱:乙酰羧化酶(ACC)微量法測(cè)試盒
規(guī)格 : 100管/48樣
測(cè)試方法: 微量法
貨號(hào):GOY-01S6646
分類:脂肪酸代謝系列
商品介紹:
ACC在生物體內(nèi)催化乙酰羧化生成丙二酰,,是脂肪酸和許多次生代謝產(chǎn)物合成的關(guān)鍵酶。ACC的活性在一定程度上決定了脂肪酸的合成速度和含油量的高低,。
測(cè)定原理
ACC能夠催化乙酰,、NaHCO3和ATP生成丙二酰、ATP和無機(jī)磷,,通過鉬酸銨定磷法測(cè)定無機(jī)磷的增加量來測(cè)定ACC活性,。
需自備的儀器和用品
分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋,、臺(tái)式離心機(jī),、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿,、研缽,、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,,4℃保存,。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存,。
試劑一:粉劑×1瓶,,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存,;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,,-20℃保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存,;
試劑四:液體50mL×1瓶,, 4℃保存,;
測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,,調(diào)節(jié)波長至340nm,,蒸餾水調(diào)零。
2,、 將試劑一,、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘,。
3,、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,,加入1mL提取液一,,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,,破碎3s,,間歇7s,總時(shí)間1min),,然后4℃,,8000g離心10min,取上清測(cè)定,。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,,200g離心5min,,棄沉淀,取上清在4℃,,8000g離心10min,,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,,破碎3s,,間歇7s,總時(shí)間1min),,然后4℃,,8000g離心10min,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性,。
建議測(cè)定總FBP酶活性,,按照步驟①提取粗酶液,,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液,。
腺嘌呤0酸核糖轉(zhuǎn)移酶抗體 組蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶5抗體
0酸化水通道蛋白2抗體 組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶SMYD4抗體
ADP核糖基化因子1抗體 組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶SMYD2抗體
ADP核糖基化因子5抗體 組蛋白甲基化KMT3B抗體(雄激素受體激活蛋白)
ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白抗體 組蛋白H4抗體
大鼠白介素33(IL33)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素33(IL-33)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素34(IL34)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素35(IL-35)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素35(IL-35)elisa檢測(cè)試劑盒
乙酰羧化酶(ACC)微量法測(cè)試盒大提柱式細(xì)菌 RNAout5次 柱式內(nèi)毒素清除劑1.5mL
一管式病毒 RNAout50 次 柱式毛發(fā) DNAout50 次
一管式病毒 RNAout200 次 柱式昆蟲 RNAout50 次
柱式病毒 RNAout50 次 柱式昆蟲 mtDNAout,,測(cè)序級(jí)10 次
柱式病毒 RNA-DNA 雙提試劑盒50 次 柱式昆蟲 DNAout50 次
FBP活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位,。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),,6.22×103 L / mol /cm,;d:比色皿光徑,1cm,;V樣:加入樣本體積,,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,,1mL,;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min,;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,,g,。