【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細閱讀購買說明！
產(chǎn)品名稱：土壤漆酶微量法測試盒
規(guī)格 : 100管/48樣
測試方法: 微量法
貨號：GOY-01S6867
分類：土壤系列
商品介紹：
漆酶（Laccase）是一種含銅的多酚氧化酶,，屬于銅藍氧化酶家族，廣泛分布于真菌和高等植物中,，具有較強的氧化還原能力,，在紙漿生物漂白，環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測方面有非常廣泛的應用,。

測定原理

漆酶分解底物ABTS產(chǎn)生ABTS自由基,，在420nm處的吸光系數(shù)遠大于底物ABTS，測定ABTS自由基的增加速率,，可計算得漆酶活性,。

自備實驗用品及儀器

天平、常溫離心機,、可見分光光度計,、微量石英比色皿、震蕩儀,。
試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶,，4℃保存。
提取液二：液體50mL×1瓶,，4℃保存,。
試劑一：粉劑×1瓶，-20℃保存,；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,，用不完的試劑4℃保存；
試劑二：液體18μL×1瓶,，4℃保存,；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存,；
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存,；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,，用不完的試劑4℃保存；
試劑四：液體50mL×1瓶,， 4℃保存,；
測定步驟
1,、 分光光度計預熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至340nm,，蒸餾水調(diào)零,。
2、 將試劑一,、二,、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預熱10分鐘。
3,、 加樣表：

樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一,，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴,，200W，破碎3s,，間歇7s,，總時間1min），然后4℃,，8000g離心10min,，取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱取約0.1g樣本,，加入1mL提取液一）,，冰浴勻漿后于4℃，200g離心5min,，棄沉淀,，取上清在4℃，8000g離心10min,，取上清用于測定胞漿FBP酶活性,，取沉淀加1mL提取液二，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴,，200W,，破碎3s，間歇7s,，總時間1min）,，然后4℃，8000g離心10min,，取上清測定葉綠體中FBP酶活性,。
建議測定總FBP酶活性，按照步驟①提取粗酶液,，若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,，則按照步驟②提取粗酶液,。
環(huán)腺苷酸應答元件結(jié)合蛋白H抗體     糖代謝相關(guān)蛋白1抗體

鈣離子通道a1F亞型抗體     唐氏綜合征細胞粘附分子抗體

鈣調(diào)0酸酶B亞基B1抗體     碳酸氫協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4-A7抗體

鈣調(diào)蛋白激酶激酶α抗體CaMKKα     碳酸氫協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4-A4突變型抗體

透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白1抗體     碳酸氫協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4-A4抗體
大鼠微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)elisa檢測試劑盒

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土壤漆酶微量法測試盒LPS(TLR4 激活劑 )0.5mg  ATP 溶液，100mM0.25mL

LY294002(PI3K 抑制劑 )1mg  APMSF 溶液,，10mg/mL1mL

Metformin(LKB1-AMPK 激活劑 )1g  AP 標記的抗抗體10μL

MG-132(Proteasome 抑制劑 )1mg  AMV cDNA 第一鏈合成試劑盒30 次

Monensin ( 蛋白轉(zhuǎn)運抑制劑 )100mg  Aminoally-dUTP 溶液,，10mM100μL
FBP活性計算：
（1）按樣本蛋白濃度計算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位,。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應體系總體積,，1×10-3 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù),，6.22×103 L / mol /cm,；d：比色皿光徑，1cm,；V樣：加入樣本體積,，0.1 mL；V樣總：加入提取液體積,，1mL,；T：反應時間，5 min,；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL；W：樣本質(zhì)量,，g,。