詳細(xì)介紹
產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
本系列探針是主要對(duì)活細(xì)胞中的酸性區(qū)室(如溶酶體,、頂體)動(dòng)態(tài)合成和功能進(jìn)行研究的一類熒光探針,,該類探針的染色具有向酸性,,可通過(guò)質(zhì)子化作用在酸性細(xì)胞器內(nèi)累積,。該類探針的這種質(zhì)子化作用還可解除染料的熒光淬滅性,使其所發(fā)射的熒光強(qiáng)度更強(qiáng),。因此,,本系列探針隨著細(xì)胞器的酸化程度其熒光強(qiáng)度呈pH依賴型(向酸)增強(qiáng)。本品Green DND-189具有較低的pKa值,,僅在酸性區(qū)室內(nèi)才具有熒光,。本品以溶于無(wú)水DMSO的1mM儲(chǔ)存液形式提供。如對(duì)活細(xì)胞中的酸性區(qū)室進(jìn)行選擇性標(biāo)記和染色,,可選擇SY0569,、SY0570探針。 分子式:C24H22N4O2 分子量:398.46 Ex/Em:443/505 pKa:~5.2 顏色:綠色 儲(chǔ)存條件:-20℃干燥,,有效期6個(gè)月 |
下列是產(chǎn)品的訂購(gòu)信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號(hào) |
Lysosome Green DND-189 | 50μl | GOY-F10235 |
DNA提取流程圖:
實(shí)驗(yàn)步驟
(1)實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可,!固體培養(yǎng)就更好說(shuō)了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過(guò)夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無(wú)水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量
(在抽提過(guò)程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
人組酸豐富糖蛋白(HRG)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human HRG (Histidine Rich Glycoprotein) ELISA Kit 3,4-O-Isopropylidene shikimic acid 183075-03-8 中文名: 分子式:C10H14O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 莽草酸; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
人組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒 3,4-O-Isopropylidene shikimic acid 中文名: 分子式:C10H14O5 度:98.0%
人組胺elisa試劑盒 人組胺試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人組胺試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:人組胺試劑盒、人組胺elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。 3,4-Dihydro-3,4-dihydroxynaphthalen-1(2H)-one 1220891-22-4 中文名: 分子式:C10H10O3 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 四氫萘酮; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
人組胺(HIS)ELISA試劑盒 3,4-O-Isopropylidene shikimic acid 中文名: 分子式:C10H14O5
人組胺(HIS)ELISAKit 3,4-Didehydrosapriparaquione 142763-37-9 中文名: 分子式:C20H24O3 度:95.0% 關(guān)鍵詞:
N-芐氧羰基-L- Z-Gln-OH 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR ELISAKitAChRab人乙酰受體抗體規(guī)格:48T/96T
N-CBZ-L-丙 CBZ-L-Gly 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF/FGF-7)ELISA試劑盒 ,,英文名: KGF/FGF-7 ELISA Kit
鹽酸丙美卡因 Proparacaine HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratmyelinbasicprotein,MBPELISAKit 96T/48T
N-芐氧羰基-L-絲 Z-Ser-OH 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR 人促甲狀受體(TSHR)抗體試劑盒 Human TSHR aibody ELISA Kit
N-芐氧羰基-L-蘇 Z-Thr-OH 質(zhì)量規(guī)格:0.98 RatsolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)酶聯(lián)分析大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)酶聯(lián)分析體(sEPCR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
N-CBZ-beta-丙 Z-β-Ala-OH 質(zhì)量規(guī)格:0.98 HSV(HERPESSIMPLX)病毒標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒2
CBZ-D-谷α-芐酯 Z-Glu-OBzl 質(zhì)量規(guī)格:>98% Mouseα-L-iduronidase,IDUAELISA試劑盒小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
N-芐氧羰基-L-酪 Z-Tyr-OH 質(zhì)量規(guī)格:0.98 小鼠角化細(xì)胞因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒 ,,英文名: AR ELISA Kit
Z-L-酪甲酯 Z-Tyr-OMe 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA檢測(cè)試劑盒RatCyclin-D1ELISAKit 96T/48T
鈉 Amoxicillin 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR 人促甲狀受體(TSHR)試劑盒 Human TSHR ELISA Kit
溶酶體綠色熒光探針細(xì)胞組織D(CATHEPSIN D)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
體液樣品組織B(CATHEPSIN B)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
血液樣品組織B(CATHEPSIN B)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
組織樣品組織B(CATHEPSIN B)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞組織B(CATHEPSIN B)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過(guò)TRIzol體積10℅,。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次,。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染,。
c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,,每5-10×106動(dòng)物、植物,、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解,。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理,。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離,。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),,脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,,多糖,,高分子量DNA,上清中含有RNA,。處理脂肪組織時(shí),,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作,。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘,。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘,。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無(wú)色水相和一個(gè)中間層,。RNA主要在水相中,,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,,進(jìn)一步操作見(jiàn)后,。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,,室溫放置10分鐘,。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀,。移去上清。