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當(dāng)前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>探針標(biāo)記及檢測>> 300TiFluor 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色)

iFluor 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色)

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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號300T

品       牌R&D/美國

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-22 11:37:04瀏覽次數(shù):349次

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供貨周期 現(xiàn)貨 貨號 GOY-F10204
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 僅供科研使用
iFluor 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色)公司正*的各種產(chǎn)品動物線粒體呼吸鏈復(fù)合物V(F0F1-ATP酶/ATP合成酶)活性
(KALLIKREIN)活性比色法定量檢測試劑盒
細胞血紅素氧合酶(HEME OXYGENASE)活性比色法定量檢測試劑盒
組織血紅素氧合酶(HEME OXYGENASE)活性比色法定量檢測試劑盒
體外非細胞系統(tǒng)血紅素氧合酶(HEME OXYGENASE)活性比色法定量檢測

DNA提取流程圖:

QQ截圖20220414142532.png

下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

貨號

iFluor 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色)

iFluor 488   phalloidin

300T

GOY-F10204

產(chǎn)品詳細介紹:

本品為iFluor 488標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽,,可發(fā)出高亮度,、光穩(wěn)定的綠色熒光,染色反應(yīng)特異性強,對比性高,具有比Actin抗體更好的染色效果,適合用作F-actin的定性和定量檢測,。iFluor 488 鬼筆環(huán)肽染色與用于細胞分析的其他熒光染色*兼容,,包括熒光蛋白、納米晶體和其他iFluor偶聯(lián)物(包含iFluor偶聯(lián)二抗),。另外,,經(jīng)本品結(jié)合后的F-actin仍能維持actin自身具有的許多生物學(xué)特性。且本品的結(jié)合沒有物種差異性,,適用性廣泛,。本品以1000×儲存液形式(溶于DMSO)提供。

鬼筆環(huán)肽(Phalloidin)是一種來源于毒蕈類鬼筆鵝膏(Amanita   phalloides)的環(huán)狀七肽毒素,,以高親和力(Kd= 20 nM)選擇性結(jié)合于絲狀肌動蛋白F-actin,,而不會與單體肌動蛋白G-actin結(jié)合,通常用來標(biāo)記組織切片,、細胞培養(yǎng)物或無細胞體系中的F-actin,,從而對F-actin進行定性和定量分析。另外,,鬼筆環(huán)肽衍生物也以相近的親和力結(jié)合于大小纖維,,無論是動植物來源的肌肉細胞或非肌肉細胞,按照每一個肌動蛋白亞基約與一個鬼筆環(huán)肽分子的計量比結(jié)合,。且非特異性結(jié)合幾乎可忽略,,染色區(qū)域和非染色區(qū)域辨識度非常明顯。因此,,鬼筆環(huán)肽衍生物特別適合替代肌動蛋白(Actin)抗體進行相關(guān)研究,。另外鬼筆環(huán)肽衍生物很小,直徑約12-15?,,分子量<2000 Daltons,,未標(biāo)記肌動蛋白(Actin)的許多生理特性都得以維持,比如,,同肌動蛋白結(jié)合蛋白如肌球蛋白,,原肌球蛋白,DNase I等仍能發(fā)生反應(yīng),;鬼筆環(huán)肽標(biāo)記的纖維絲仍可穿透固相肌球蛋白基質(zhì),;以及甘油抽提的肌纖維標(biāo)記后仍可收縮等。

鬼筆環(huán)肽(Phalloidin)的結(jié)合阻止絲狀肌動蛋白(微絲)的解離,,穩(wěn)定微絲結(jié)構(gòu),,從而破壞微絲的聚合-去聚合的動態(tài)平衡。此特性使得肌動蛋白聚合發(fā)生的臨界濃度(CC)降至<1μg/mL,因此,,可用作一種聚合促進劑,。此外,鬼筆環(huán)肽還可抑制F-actinATP水解活性,。

分子量:~1900

大激發(fā)/發(fā)射波長:493/517nm

溶解性:溶于DMSO

儲存條件:-20℃避光干燥,,有效期一年

 

操作步驟:
1.
勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅,。
b.
單層培養(yǎng)細胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細胞,,每10cm2面積(3.5cm直徑的培養(yǎng)板)1ml,用移液器吸打幾次,。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,,不取決于細胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNADNA污染,。
c
.細胞懸液 離心收集細胞,,每5-10×106動物、植物,、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解,。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理,。
2
.將勻漿樣品在室溫(15-30)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離,。
3
.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),,脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-810000×g離心10分鐘,,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,,多糖,,高分子量DNA,上清中含有RNA,。處理脂肪組織時,,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作,。
5.
每使用1ml TRIzol加入0.2ml,,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘,。
6. 2-8
10000×g離心15分鐘,。樣品分為三層:底層為黃色有機相,,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅,。
7.
把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機相,,進一步操作見后,。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,,室溫放置10分鐘,。
8. 2-8
10000×g離心10分鐘,,離心前看不出RNA沉淀,,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清,。
蘇云金芽孢桿菌蛋白(BT)ELISA試劑盒     4-Amino-N-methylbenzamide  6274-22-2  中文名:4-氨基-N-甲酰胺  分子式:C8H10N2O 

蘇木素染液   Fast HE tissues and exfoliated cells of dye  4,6-Dichloro-5-nitro-2-propylthiopyrimidine  145783-14-8  中文名:  分子式:C7H7Cl2N3O2S 

松弛素-2   英文名稱:   Human Relaxin-2   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   RLN-2  4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene  中文名:4,4'-(2-苯并惡唑基)  分子式:C28H18N2O2  度:98.0%

四硼酸   5kg  4,5-Dimethoxy-1-cyanobenzocyclobutane  中文名:  分子式:C11H11NO2  度:98.0%

四甲基聯(lián)   5g  4-(Phenylthio)benzyl alcohol  中文名:  分子式:C13H12OS  度:98.0%
L-
賴鹽酸鹽  H-Lys-OH.HCl  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 大鼠酶(CA)ELISA檢測試劑盒Ratcarbonicanhydrase,CAELISAKit 96T/48T

L-鳥鹽酸鹽  L-Ornithine mono  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人單皰疹病毒Ⅰ+Ⅱ型(HSV+)抗體(IgG)試劑盒 Human herpes simplexvirus +(HSV+)aibody(IgG)ELISA kit

L-天門冬  L-Aspartic acid  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR ratProstaglandinF,PG-FELISAKit大鼠前列F(PGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

L-天門冬(標(biāo)準(zhǔn)品)  L-Aspartic acid  質(zhì)量規(guī)格:>99%(T),標(biāo)準(zhǔn)品 HepatitisBvirusRFLP基因分析試劑盒20

L-半胱胺酸鹽酸鹽無水物  L-Cysteine ,,anhydrous  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR MouseTumornecrosisfactorα,TNF-αELISA試劑盒小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

羧甲司坦;S-羧甲基-L-半胱  Carbocistein;S-Carboxymethyl-L-cysteine  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠抗促甲狀受體抗體(Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: Ab ELISA Kit

S-芐基-L-半胱  S-Benzyl-L-cysteine  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA檢測試劑盒RatEndotheliallipase,ELELISAKit 96T/48T

L-谷鹽酸鹽  L-Glutamic acid   質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 人單胺氧化酶(MAO)試劑盒 Human monoamine oxidase,MAO ELISA Kit

N'-硝基-L-(L-NNA)  Nω-Nitro-L-arginine  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR RatProstaglandinF2α,PGF2αELISAKit大鼠前列F2α(PGF2α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Nα-苯甲酰-L-  Nalpha-Benzoyl-L-arginine  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Hexamer(隨機引物)(200納克/微升)100微升
iFluor 488
標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色)細胞基質(zhì)金屬(MMP)原位明膠酶譜法(in situ zymography)熒光染色試劑盒

冰凍切片基質(zhì)金屬(MMP)原位明膠酶譜法(in situ zymography)熒光染色試劑盒

細胞/組織蛋白(基質(zhì)金屬)樣品制備試劑盒

CM transferrin -zymography電泳分析試劑盒(MMP7

基質(zhì)金屬(MMP)羧甲基轉(zhuǎn)鐵蛋白

實驗步驟
(1)
實驗開始前將RNA提取液于65水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
(2)
取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可,!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65
水浴3-10 min,期間混勻2-3
(4)
加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(5)
取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(6)
加入1/4V體積10M LiCl溶液,4放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4
離心20min
(8)
棄上清,500ul SSTE溶解沉淀
(9)
::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
(10)
2V體積的無水乙,-70冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4
離心20 min
(12)
棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)
200ulDEPC處理水溶解
(14)
用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
(
在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))


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