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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
本品為iFluor 555標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽,，可發(fā)出橘紅色的熒光,，具有的高亮度和光穩(wěn)定性,，且染色反應(yīng)特異性強(qiáng)，對(duì)比性高,，具有比Actin抗體更好的染色效果,，適合用作F-actin的定性和定量檢測(cè)。iFluor 555 鬼筆環(huán)肽染色與用于細(xì)胞分析的其他熒光染色*兼容,，包括熒光蛋白,、納米晶體和其他iFluor偶聯(lián)物（包含iFluor偶聯(lián)二抗）。另外,，經(jīng)本品結(jié)合后的F-actin仍能維持actin自身具有的許多生物學(xué)特性,。且本品的結(jié)合沒有物種差異性，適用性廣泛,。本品以1000×儲(chǔ)存液形式（溶于DMSO）提供,。 鬼筆環(huán)肽（Phalloidin）是一種來源于毒蕈類鬼筆鵝膏（Amanita phalloides）的環(huán)狀七肽毒素，以高親和力（Kd= 20 nM）選擇性結(jié)合于絲狀肌動(dòng)蛋白F-actin,，而不會(huì)與單體肌動(dòng)蛋白G-actin結(jié)合,，通常用來標(biāo)記組織切片、細(xì)胞培養(yǎng)物或無細(xì)胞體系中的F-actin,，從而對(duì)F-actin進(jìn)行定性和定量分析,。另外，鬼筆環(huán)肽衍生物也以相近的親和力結(jié)合于大小纖維,，無論是動(dòng)植物來源的肌肉細(xì)胞或非肌肉細(xì)胞,，按照每一個(gè)肌動(dòng)蛋白亞基約與一個(gè)鬼筆環(huán)肽分子的計(jì)量比結(jié)合。且非特異性結(jié)合幾乎可忽略,，染色區(qū)域和非染色區(qū)域辨識(shí)度非常明顯,。因此，鬼筆環(huán)肽衍生物特別適合替代肌動(dòng)蛋白（Actin）抗體進(jìn)行相關(guān)研究,。另外鬼筆環(huán)肽衍生物很小,，直徑約12-15?，分子量＜2000 Daltons,，未標(biāo)記肌動(dòng)蛋白（Actin）的許多生理特性都得以維持,，比如，同肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白如肌球蛋白,，原肌球蛋白,，DNase I等仍能發(fā)生反應(yīng)；鬼筆環(huán)肽標(biāo)記的纖維絲仍可穿透固相肌球蛋白基質(zhì),；以及甘油抽提的肌纖維標(biāo)記后仍可收縮等,。 鬼筆環(huán)肽（Phalloidin）的結(jié)合阻止絲狀肌動(dòng)蛋白（微絲）的解離，穩(wěn)定微絲結(jié)構(gòu),，從而破壞微絲的聚合-去聚合的動(dòng)態(tài)平衡,。此特性使得肌動(dòng)蛋白聚合發(fā)生的臨界濃度（CC）降至＜1μg/mL，因此,，可用作一種聚合促進(jìn)劑,。此外，鬼筆環(huán)肽還可抑制F-actin的ATP水解活性,。 分子量：～1300 大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)：556/574nm 溶解性：溶于DMSO 儲(chǔ)存條件：-20℃避光干燥,，有效期一年 |
下列是產(chǎn)品的訂購(gòu)信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號(hào) |
iFluor 555 phalloidin | 300T | GOY-F10203 |
DNA提取流程圖：
實(shí)驗(yàn)步驟
(1)實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
酸性成纖維生長(zhǎng)因子 英文名稱： acid fibroblast growth factor 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： a-FGF 4,4'-Bis(diethylamino)benzophenone 90-93-7 中文名：四乙基米氏酮 分子式：C21H28N2O 度：98.0%
酸性0酸酶（ACP）檢測(cè) Prostate acid enzyme (PACP) detection Polypodine B 18069-14-2 中文名：水龍骨甾酮B 分子式：C27H44O8 度：97.5% 關(guān)鍵詞： 昆蟲蛻皮激素活性; 歐亞水龍骨; 蛻化類固; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
酸性0酸酶（ACP）測(cè)定試劑盒（微板法） Repaglinide ethyl ester 中文名： 分子式：C29H40N2O4
酸性0酸酶（ACP）測(cè)定試劑盒（微板法） Repaglinide 中文名： 分子式：Repaglinide
素 英文名稱： Human Renin 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： RN 4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene 2397-00-4 中文名：4,4'-雙(5-甲基-2-苯并惡唑基)芪 分子式：C30H22N2O2 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
DL-賴 DL-Lysine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR ratProstaglandinE1,PG-E1ELISAKit大鼠前列E1(PGE1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
DL-精鹽酸鹽 DL-Arginine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR HelicobacterpyloriRFLP基因分析試劑盒20
左旋肉堿,；BT,；左卡尼汀 L(-)-Carnitine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-ⅠELISA試劑盒小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
左卡尼汀;左旋肉堿（標(biāo)準(zhǔn)品） Levocarnitine;L(-)-Carnitine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC含量測(cè)定 小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒 ，英文名： ssDNA ELISA Kit
L-谷鈉,，一水 L-Glutamic acid mono salt hydrate 質(zhì)量規(guī)格：>99% 大鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratcalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit 96T/48T
L-(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Glutamine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 人單皰疹病毒Ⅰ+Ⅱ型(HSVⅠ+Ⅱ)抗體(IgM)試劑盒 Human herpes simplexvirus Ⅰ+Ⅱ(HSVⅠ+Ⅱ)aibody(IgM)ELISA kit
（還原型） Glutathione (Reduced);GSH 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR RatProstaglandinE2,PG-E2ELISAKit大鼠前列E2(PGE2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
L-（標(biāo)準(zhǔn)品） Glutathione (Reduced) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品,還原型 Helly固著液50毫升
（氧化型） Glutathione(Oxidized) 質(zhì)量規(guī)格：度大于98%,BR MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-ⅡELISA試劑盒小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
DL-異亮 DL-Isoleucine 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 小鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒 ，英文名： AMA ELISA Kit
iFluor 555標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(橘色)細(xì)胞基質(zhì)金屬（MMP-9）明膠法比色定量檢測(cè)試劑盒
體液基質(zhì)金屬（MMP-2）明膠法比色定量檢測(cè)試劑盒
組織基質(zhì)金屬（MMP-2）明膠法比色定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞基質(zhì)金屬（MMP-2）明膠法比色定量檢測(cè)試劑盒
基質(zhì)金屬抑制劑（TIMP1/2/3）逆相明膠酶譜法（reverse gelatin-zymography）電泳分析試劑盒（不含標(biāo)準(zhǔn)樣）
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理,。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅,。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,，用移液器吸打幾次,。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定，不取決于細(xì)胞數(shù),。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染,。
c．細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞，每5-10×106動(dòng)物,、植物,、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,，反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解,。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理,。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復(fù)合物*分離,。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質(zhì),，脂肪，多糖或胞外物質(zhì)（肌肉,，植物結(jié)節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘,，取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,，多糖,，高分子量DNA，上清中含有RNA,。處理脂肪組織時(shí),，上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作,。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘,。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘,。樣品分為三層：底層為黃色有機(jī)相，上層為無色水相和一個(gè)中間層,。RNA主要在水相中,，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,，如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,，進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA,。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,，離心前看不出RNA沉淀,，離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清,。
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