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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>探針標(biāo)記及檢測(cè)>> 100μL線粒體橙色熒光探針
參 考 價(jià) | 面議 |
產(chǎn)品型號(hào)100μL
品 牌R&D/美國(guó)
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2022-04-22 11:12:38瀏覽次數(shù):415次
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號(hào) | GOY-F10182 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 僅供科研使用 |
DNA提取流程圖:
下列是產(chǎn)品的訂購(gòu)信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號(hào) |
MitoOrange | 100μL | GOY-F10182 |
產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
具有細(xì)胞膜滲透性的MitoOrange(分子量427.4)探針包含一個(gè)溫和的巰基反應(yīng)性氯甲基基團(tuán),,可用于標(biāo)記線粒體,并在固定之后保留在線粒體內(nèi),。標(biāo)記線粒體,,細(xì)胞可以與MitoOrange 探針簡(jiǎn)單孵育,,探針通過被動(dòng)擴(kuò)散傳過質(zhì)膜,并在有活性的線粒體內(nèi)富集,。一旦線粒體被標(biāo)記,,細(xì)胞再用醛基類固定劑固定之后,就可以進(jìn)一步做下游實(shí)驗(yàn)的深入處理,。這些MitoOrange 染料可以解決一些致病性細(xì)胞上研究所面臨的困難,,因?yàn)闃?biāo)記線粒體可以在細(xì)胞被固定之前開展。 雖然傳統(tǒng)的熒光染料,,如四甲基羅丹明和羅丹明123,,很容易識(shí)別功能性線粒體,但是這些染料一旦在線粒體去極化時(shí)也很容易被洗滌出線粒體,。這些缺點(diǎn)限制了常規(guī)染色實(shí)驗(yàn)中所用的醛類固定劑,,以及一些實(shí)驗(yàn)用的處理藥品的選擇。而MitoView 染料可以很好的解決這一問題,。 濃度:0.5mM in DMSO 儲(chǔ)存:-20℃,,避光,有效期6個(gè)月 |
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理,。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅,。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,,用移液器吸打幾次,。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù),。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染,。
c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動(dòng)物,、植物,、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打,。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解,。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,,使核酸蛋白復(fù)合物*分離,。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,,取上清,。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,,多糖,高分子量DNA,,上清中含有RNA,。處理脂肪組織時(shí),上層有大量油脂應(yīng)去除,。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作,。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,,室溫放置3分鐘,。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,,上層為無(wú)色水相和一個(gè)中間層,。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅,。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見后,。用異丙沉淀水相中的RNA,。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘,。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀,。移去上清,。
兔補(bǔ)體蛋白3elisa試劑盒 兔補(bǔ)體蛋白3試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔補(bǔ)體蛋白3試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:兔補(bǔ)體蛋白3試劑盒、兔補(bǔ)體蛋白3 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。 4-Bromomethyl-2-cyanobiphenyl 114772-54-2 中文名: 分子式:C14H10BrN 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISAKit 5-Chloro-4-methoxy-2-oxo-1,2-dihydropyridine-3-carbonitrile 中文名: 分子式:C7H5ClN2O2 度:98.0%
兔半胱酸蛋白酶抑制劑elisa試劑盒 兔半胱酸蛋白酶抑制劑試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔半胱酸蛋白酶抑制劑試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:兔半胱酸蛋白酶抑制劑試劑盒,、兔半胱酸蛋白酶抑制劑elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 4-Bromomethyl-2-cyanobiphenyl 114772-54-2 中文名: 分子式:C14H10BrN
兔半胱酸蛋白酶抑制劑C 英文名稱: Rabbit Cystatin C 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: CSTC 4-Oxododecanedioic acid 中文名: 分子式:C12H20O5
兔半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒 5-(1-Piperazinyl)benzofuran-2-carboxamide 183288-46-2 中文名: 分子式:C13H15N3O2
羥基磷灰石 Hydroxyapatite 質(zhì)量規(guī)格:>99%,粒徑20nm RatPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISAKit大鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
羥丙基甲基纖維素(粘度11250-21000mPas) Hydroxy Propyl Methyl Cellulose/HPMC K15M 質(zhì)量規(guī)格:粘度11250-21000mPas GSK-3ALPHA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25
羥丙基甲基纖維素 Hydroxypropylmethylcellulose 質(zhì)量規(guī)格:粘度55 - 60 mPa.s MouseTestoterone,TELISA試劑盒小鼠睪同(T)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
羥丙基甲基纖維素(30000 mpa.s) HPMC, hydroxypropyl methyl cellulose 質(zhì)量規(guī)格:30000 mpa.s,BR 小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)ELISA試劑盒 ,,英文名: PCNA ELISA Kit
羥丙基甲基纖維素(4000mpas) HPMC, hydroxypropyl methyl cellulose 質(zhì)量規(guī)格:粘度K4m,,4000 mpa.s 人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA檢測(cè)試劑盒Human5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISAKit 96T/48T
麥芽糖;淀粉糖 D-(+)-Maltose monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:>92%,一水物 大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)試劑盒 Rat alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit
ONX-0914 (PR-957) ONX0914;PR957 質(zhì)量規(guī)格:>98%,immunoproteasome抑制劑 英文名稱RatLaminaPropriaLymphocyteELISAKit大鼠脂蛋白脂酶(LPL)規(guī)格:96T/48T
N-壬酰基-N-甲基葡萄糖胺(MEGA9) N-Nonanoyl-N-methylglucamine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 高多糖多酚植物組織葉綠體DNA高分離試劑盒10/20
甲基纖維素(100000mPa.s) Methyl cellulose 質(zhì)量規(guī)格:粘度100000mPa.s ELISAKitFT4人游離甲狀規(guī)格:48T/96T
甲基纖維素(4000 mPa.s) Methyl cellulose, middle viscosity 質(zhì)量規(guī)格:4000mPa.s,BR 小鼠抗(AT)ELISA試劑盒 ,,英文名: AT ELISA Kit
線粒體橙色熒光探針組織AURORA-B激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
細(xì)胞AURORA-B激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
組織AURORA-A激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
細(xì)胞AURORA-A激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
組織Akt/PKB激酶總活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
實(shí)驗(yàn)步驟
(1)實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可,!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無(wú)水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
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