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當(dāng)前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>探針標(biāo)記及檢測>> 200μLCa2+ GPCR分析-鈣離子指示探針 Fluo-3, AM

Ca2+ GPCR分析-鈣離子指示探針 Fluo-3, AM

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產(chǎn)品型號200μL

品       牌R&D/美國

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-22 11:08:54瀏覽次數(shù):185次

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供貨周期 現(xiàn)貨 貨號 GOY-F10178
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 僅供科研使用
Ca2+ GPCR分析-鈣離子指示探針 Fluo-3, AM公司正*的各種產(chǎn)品組織半胱-8(CASPASE-8)活性比色法定量檢測試劑盒
細胞半胱-8(CASPASE-8)活性熒光定量檢測試劑盒
組織半胱-8(CASPASE-8)活性熒光定量檢測試劑盒
細胞半胱-9(CASPASE-9)活性比色法定量檢測試劑盒
組織半胱-9(CASPASE-9)活性比色法定量檢測試劑盒

DNA提取流程圖:

QQ截圖20220414142532.png

下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

貨號

Ca2+ GPCR分析-鈣離子指示探針 Fluo-3, AM

Fluo-3, AM

200μL

GOY-F10178

產(chǎn)品詳細介紹:

Fluo-2 早是由Roger Tsien 博士發(fā)明的鈣離子指示劑Fluo 系列之一,,目前,Fluo-3 Fluo-4 已成熟商品化,。然而,,Fluo-2 在細胞內(nèi)比Fluo-4 要更明亮,,主要可能是由于大部分細胞對FLuo-2 的加載能力要高于FLuo-4

Fluo-3 成像涉及到鈣離子信號通路的多個方面,,Fluo-3 經(jīng)常應(yīng)用在流式細胞術(shù)上,,如螯合劑光活化、第二信使,、神經(jīng)遞質(zhì)以及細胞水平的藥理篩選,。Fluo-3 在這些應(yīng)用里之所以能大量運用主要是由于其幾個重要特性:Fluo-3 可以被氬離子激光器488nm 激發(fā),并在與Ca2+結(jié)合后,,發(fā)射熒光很明亮的熒光信號,。Fluo-4 Fluo-3 以兩個氟原子取代氯原子的類似物,這一微小的結(jié)構(gòu)變化使得Fluo-4探針在488nm 激發(fā)光下的熒光信號得到增強,,信號穩(wěn)定持續(xù),,可以應(yīng)用于共聚焦顯微鏡、流式細胞儀,、微孔板讀數(shù)儀,。

Fluo-2Fluo-3 Fluo-4 在與Ca2+結(jié)合后熒光增強,,與紫外激發(fā)的探針fura-2 indo-1 不同,,不會發(fā)生光譜漂移。熒光光密度在與Ca2+結(jié)合后,,增強至少100 倍,。

儲存:-20℃,避光,,有效期12個月,。

 

操作步驟:
1.
勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅,。
b.
單層培養(yǎng)細胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細胞,,每10cm2面積(3.5cm直徑的培養(yǎng)板)1ml,用移液器吸打幾次,。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細胞數(shù),。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNADNA污染,。
c
.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物,、植物,、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打,。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解,。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理,。
2
.將勻漿樣品在室溫(15-30)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離,。
3
.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),,脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-810000×g離心10分鐘,,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,,多糖,,高分子量DNA,上清中含有RNA,。處理脂肪組織時,,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作,。
5.
每使用1ml TRIzol加入0.2ml,,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘,。
6. 2-8
10000×g離心15分鐘,。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層,。RNA主要在水相中,,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅
7.
把水相轉(zhuǎn)移到新管中,,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機相,,進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA,。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,,室溫放置10分鐘。
8. 2-8
10000×g離心10分鐘,,離心前看不出RNA沉淀,,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清,。
兔鉤端螺旋體IgGelisa試劑盒   兔鉤端螺旋體IgG試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   兔鉤端螺旋體IgG試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:兔鉤端螺旋體IgG試劑盒,、兔鉤端螺旋體IgG elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。  4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide  中文名:  分子式:C10H16N2O6S3  度:98.0%

兔鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISAKit     6-Benzyloxyindole  15903-94-3  中文名:6-芐氧基吲哚  分子式:C15H13NO 

兔鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒     4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide  154127-42-1  中文名:  分子式:C10H16N2O6S3 

兔睪(rabbit TESTO)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝  4-Difluoromethoxy-3-hydroxybenzaldehyde  151103-08-1  中文名:  分子式:C8H6F2O3  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

兔干細胞因子(rabbit SCF)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝  4-Chlorotestosterone acetate  855-19-6  中文名:醋酸氯  分子式:C21H29ClO3  度:98.0%  關(guān)鍵詞:
十二烷基硫酸鋰  Lithium Dodecyl Sulfate  質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級 MousesubstancePreceptor,SP-RELISA試劑盒小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

硫代甜菜堿 8  Sulfobetaine 8  質(zhì)量規(guī)格:>98%,sigma分裝 小鼠顆粒酶B(GZMB)ELISA試劑盒 ,英文名: GZMB ELISA Kit

硫代甜菜堿 10  Sulfobetaine 10  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)ELISA檢測試劑盒Humaeceptorforadvancedglycationendproducts,RAGE/AGERELISAKit 96T/48T

硫代甜菜堿 12  Sulfobetaine 12,SDDAB  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠血清素(5-羥色胺)-N-乙?;D(zhuǎn)移酶(AANAT)試劑盒 Rat Serotonin N-acetylansferase,AANAT ELISA kit

恩他卡朋;COMT抑制劑  Entacapone  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 英文名稱RatLBPELISAKit大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)規(guī)格:96T/48T

曲拉通X-114  Triton X-114  質(zhì)量規(guī)格:BC 高多糖多酚植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20

曲拉通X-405  Triton X-405  質(zhì)量規(guī)格:70% in H2O ELISAKitFree-T3人游離三甲狀腺原規(guī)格:48T/96T

CHAPS;3-[3-(膽酰胺丙基)二甲氨基]-1-丙磺酸  CHAPS  質(zhì)量規(guī)格:>98.5% 小鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒 ,,英文名: Gzms-A ELISA Kit

CHAPSO3-[(3-膽氨丙基)二甲基氨基]-2-羥基-1-丙磺酸  CHAPSO  質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級,; 大鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA檢測試劑盒RatTissuePolypeptideAigen,TPAELISAKit 96T/48T

二硫赤蘚(DTE),;1,4-二硫代赤蘚  1,4-Dithioerythritol   質(zhì)量規(guī)格:>99%,進分sigma 人蛋白激酶C beta II(PKC-bII)試劑盒 Human Protein Kinase C beta II,PKC-bII ELISA Kit
Ca2+ GPCR
分析-鈣離子指示探針 Fluo-3, AM組織C-TAK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

細胞C-TAK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

組織B-RAF激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

細胞B-RAF激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

組織AMPK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

實驗步驟
(1)
實驗開始前將RNA提取液于65水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
(2)
取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65
水浴3-10 min,期間混勻2-3
(4)
加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(5)
取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(6)
加入1/4V體積10M LiCl溶液,4放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4
離心20min
(8)
棄上清,500ul SSTE溶解沉淀
(9)
::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
(10)
2V體積的無水乙,-70冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4
離心20 min
(12)
棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)
200ulDEPC處理水溶解
(14)
用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
(
在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))


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