化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號 |
PCR DNA Labeling Kit | 5次 | GOY-F10167 |
產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品特點(diǎn)： 1.一站式,，本試劑盒提供經(jīng)過優(yōu)化的試劑，不需要用戶自己摸索,。。 2. 足夠10次50μl體系的常規(guī)PCR(用于制備標(biāo)記反應(yīng)的模板和設(shè)置對照反應(yīng))和5次50μl體系的標(biāo)記反應(yīng),。 3.一次標(biāo)記可以得到μg級的雙鏈DNA探針或約700ng的單鏈DNA探針,，足夠多次雜交實(shí)驗(yàn)用。 4. 既可用于制備雙鏈探針,，也可以用于單鏈探針,。 5. 90604A需自備含標(biāo)記核苷酸的dNTP，90604B和90604C分別含和標(biāo)記的底物,。自備的標(biāo)記包括fluorescein-dUTP,、hydroxycoumarin-dUTP、resorufin-dUTP和aminoallyl-dUTP等,。 6. 本產(chǎn)品得到的探針參入率一般為4-5%(每100個(gè)核苷酸中有4-5個(gè)將帶有非同位素標(biāo)記),，有效降低了空間阻礙，檢測效果佳,。 7.可以用于Southern和Northern Blot,、原位雜交、菌落和斑點(diǎn)印跡雜交等分析,。 注：標(biāo)記專用PCR Mix不含dNTP,。 儲存條件：低溫運(yùn)輸，-20℃保存,，有效期一年,。 |
DNA提取流程圖：
實(shí)驗(yàn)步驟
(1)實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理,。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅,。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,，不取決于細(xì)胞數(shù),。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c．細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞，每5-10×106動物,、植物,、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol，反復(fù)吸打,。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解,。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘,，使核酸蛋白復(fù)合物*分離,。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質(zhì)，脂肪,，多糖或胞外物質(zhì)（肌肉,，植物結(jié)節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清,。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,，多糖，高分子量DNA,，上清中含有RNA,。處理脂肪組織時(shí)，上層有大量油脂應(yīng)去除,。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作,。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒,，室溫放置3分鐘,。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機(jī)相,，上層為無色水相和一個(gè)中間層,。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅,。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,，如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相，進(jìn)一步操作見后,。用異丙沉淀水相中的RNA,。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙，室溫放置10分鐘,。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀,。移去上清,。
兔抗腦組織抗體elisa試劑盒 兔抗腦組織抗體試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 兔抗腦組織抗體試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：兔抗腦組織抗體試劑盒,、兔抗腦組織抗體elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 5-(4-(2-(5-Ethylpyridin-2-yl)ethoxy)benzylidene)thiazolidine-2,4-dione 中文名： 分子式：C19H18N2O3S
兔抗腦組織抗體(ABAb)ELISAKit 5-(4-((3-chloro-4-((3-fluorobenzyl)oxy)phenyl)amino)quinazolin-6-yl)furan-2-carbaldehyde 231278-84-5 中文名： 分子式：C26H17ClFN3O3 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
兔抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒 5-(4-(2-(5-Ethylpyridin-2-yl)ethoxy)benzylidene)thiazolidine-2,4-dione 144809-28-9 中文名： 分子式：C19H18N2O3S
兔抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISAKit 5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal 中文名： 分子式：C21H32O3 度：98.0%
兔巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-5(rabbit MIP-5) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Hydroxymethylfurfural 中文名：5-羥甲基糠醛 分子式：C6H6O3
(R)-(-)-2,2,2-三氟-1-(9-蒽基)乙(>99.0%(GC)) (R)-(-)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC) HumanAlpha1Aichymoypsin,AACTELISA試劑盒人α1抗胰糜蛋白酶(AACT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
(S)-(+)-2,2,2-三氟-1-(9-蒽基)乙(>99.0%(GC)) (S)-(+)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC) 植物β1,，3D葡聚糖合成酶活性比色法定量檢測試劑盒20
N-(2-羧基苯甲酰)-(-)-10,2-樟腦磺內(nèi)酰胺(>98.0%(HPLC)(T)) N-(2-Carboxybenzoyl)-(-)-10,2-camphorsultam 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T) Mouse50%complemehemolysis,CH50ELISAKit小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
對茴香酸(>99.0%(GC)(T)) p-Anisic Acid 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)(T) 小鼠可溶性Toll樣受體9(sTLR9/sCD289)ELISA試劑盒 ,，英文名： sTLR9/sCD289 ELISA Kit
9-蒽羧酸(>97.0%(GC)(T)) 9-Anthracenecarboxylic Acid 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)(T) 大鼠雙氫(DHT)ELISA檢測試劑盒RatDihydrotestosterone,DHTELISAKit 96T/48T
5-(4-甲氧羰基)-10,15,2-三卟吩(>90.0%(HPLC)) 5-(4-Methoxycarbonylphenyl)-10,15,20-triphenylporphyrin 質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(HPLC) 人蛋白酶3抗體(PR3Ab)試劑盒 Human Proteinase 3 Aibody,PR3Ab ELISA Kit
2-萘甲酰氯(>98.0%(GC)(T)) 2-Naphthoyl Chloride 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T) Ratoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISAKit大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
4-二甲基氨基肉桂醛(>98.0%(T)) 4-Dimethylaminocinnamaldehyde 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) GILLS蘇木素復(fù)染試劑盒50
2,3-萘二羧酸酐(>95.0%(GC)(T)) 2,3-Naphthalenedicarboxylic Anhydride 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)(T) Mousesolublemyosinheavychain2,sMHC-2ELISA試劑盒小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
2,4,6-三(十五氟庚基)-1,3,5-三嗪(>98.0%(GC)) 2,4,6-3(pentadecafluoroheptyl)-1,3,5-triazine 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 小鼠可溶性Toll樣受體4(sTLR4)ELISA試劑盒 ，英文名： sTLR4 ELISA Kit
PCR法DNA探針標(biāo)記試劑盒細(xì)胞IRAK1激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
組織IKKβ激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
細(xì)胞IKKβ激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
組織IKKα激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
細(xì)胞IKKα激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
化工儀器網(wǎng)