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供貨周期	現(xiàn)貨	貨號(hào)	GOY-F10156
應(yīng)用領(lǐng)域	化工	主要用途	僅供科研使用

DNA提取流程圖：

下列是產(chǎn)品的訂購(gòu)信息!產(chǎn)品僅用于科研

中文名稱	英文名稱	產(chǎn)品規(guī)格	貨號(hào)
超級(jí)雜交液(不含甲酰胺)	Super hybrid solution(formamide free)	100mL	GOY-F10156

產(chǎn)品詳細(xì)介紹：

核酸雜交一般是指用一種標(biāo)記的核酸探針與印跡膜上的核酸進(jìn)行雜交,，由此檢測(cè)印跡膜上是否存在與探針同源的核酸分子(靶分子),。核酸雜交是分子生物學(xué)的基本技術(shù)之一，應(yīng)用非常廣泛,。由于核酸雜交效率受印跡膜種類(lèi),、雜交溫度、探針濃度,、雜交液離子強(qiáng)度,、雜交液pH及雜交液粘度等因素影響

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1. 既可用于Southern雜交(靶分子為DNA)，也可用于和Northern雜交(靶分子為RNA),，還可以用于菌落雜交,，基因芯片等雜交。

2. 既可以用于同位素探針的雜交,，也可以用于非同位素探針的雜交,。

3. 既可以使用DNA(包括DNA Oligo)探針，也可以使用RNA探針(包括RNA Oligo)

4.含多種能夠促進(jìn)雜交的聚合物,，使雜交反應(yīng)能在6～12小時(shí)完成,，而常規(guī)雜交反應(yīng)一般需要12～24小時(shí)。

5.含多種封堵劑,，能阻印跡膜對(duì)探針?lè)肿拥姆翘禺愋晕?，能有效降低背景信?hào)，延長(zhǎng)曝光時(shí)間以便檢測(cè)到低拷貝的RNA(Northern)和單拷貝的基因(Southern),。

6. A型不含甲酰胺,，B型含50%的甲酰胺,。后者使雜交在較低溫度就可以完成，適合Tm 較高的分子雜交(如RNA-RNA和RNA-DNA雜交),。

7.跟各種常用的印跡膜兼容,，包括硝酸纖維素膜和尼龍膜。

儲(chǔ)存條件：低溫運(yùn)輸,，-20℃保存,，有效期一年。本產(chǎn)品屬于高鹽溶液,，低溫下產(chǎn)生沉淀,，必須在65℃加熱溶解并充分搖勻后才能使用。

操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理,。樣品體積不應(yīng)超過(guò)TRIzol體積10℅,。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,，用移液器吸打幾次,。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定，不取決于細(xì)胞數(shù),。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c．細(xì)胞懸液離心收集細(xì)胞,，每5-10×106動(dòng)物,、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,，反復(fù)吸打,。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理,。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘,，使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質(zhì),，脂肪,，多糖或胞外物質(zhì)（肌肉，植物結(jié)節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘,，取上清,。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜，多糖,，高分子量DNA,，上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí),，上層有大量油脂應(yīng)去除,。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作,。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒,，室溫放置3分鐘,。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機(jī)相,，上層為無(wú)色水相和一個(gè)中間層,。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅,。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,，如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相，進(jìn)一步操作見(jiàn)后,。用異丙沉淀水相中的RNA,。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙，室溫放置10分鐘,。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀,。移去上清,。
兔乳鐵傳遞蛋白elisa試劑盒兔乳鐵傳遞蛋白試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔乳鐵傳遞蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：兔乳鐵傳遞蛋白試劑盒、兔乳鐵傳遞蛋白elisa試劑盒保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月,。 5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal 7745-40-6 中文名：分子式：C21H32O3 度：98.0%

兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISAkit 5-Aminouracil 932-52-5 中文名：5-氨基分子式：C4H5N3O2 度：98.0%

兔(LZM)ELISAKit 5-Aminosalicylic acid 中文名：5-氨基水楊酸分子式：C7H7NO3 度：98.0%

兔熱休克蛋白90elisa試劑盒兔熱休克蛋白90試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔熱休克蛋白90試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：兔熱休克蛋白90試劑盒,、兔熱休克蛋白90 elisa試劑盒保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 5-Benzimidazolecarboxylic acid 15788-16-6 中文名：5-苯并咪唑甲酸分子式：C8H6N2O2

兔熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 5-Benzoylpentanoic acid 中文名：5-苯甲?；焖?/span> 分子式：C12H14O3
二甲戊樂(lè)靈(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%) Pendimethaline 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99% 大鼠FMS樣酪激酶3(Flt3)ELISA檢測(cè)試劑盒RatFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKit 96T/48T

氯菊酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Permethrin (isomers) solution 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品人低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白酶體9(LMP7/PSMB9)試劑盒 Human LMP7/PSMB9 ELISA Kit

殘殺威標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%) Propoxur solution 質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=2% RatOncostatin-M,OSMELISAKit大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

草甘膦(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%) N-(Phosphonomethyl)glycine 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5% FLAG(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升

草甘膦標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%) N-(Phosphonomethyl)glycine solution 質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=2% MousesinglesandedDNAAibody,ssDNAELISA試劑盒小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

草甘膦標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%) N-(Phosphonomethyl)glycine solution 質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=2% 小鼠可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)ELISA試劑盒 ,，英文名： sTM ELISA Kit

(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%) Phoxim 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99% 大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratneuophilactivatingprotein-2,NAP-2ELISAKit 96T/48T

除草醚標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=5%) Nitrofen solution 質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=5% 人登革熱抗體IgM(DF-Ab IgM)試劑盒 Human dengue fever aibody IgM,DF-Ab IgM ELISA kit

2-萘氧乙酸(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-Naphthoxyacetic acid 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 RatOrexinAELISAKit大鼠阿立新A(OrexinA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

滅菌丹標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%) N-(Trichloromethylthio)phthalimide solution 質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=2% FLUORIDE血液抗凝液100毫升
超級(jí)雜交液(不含甲酰胺)組織PKCβ2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

細(xì)胞PKCβ2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

組織PKCβ1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

細(xì)胞PKCβ1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

組織PKCα激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

實(shí)驗(yàn)步驟
(1)實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養(yǎng)就更好說(shuō)了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過(guò)夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無(wú)水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量
(在抽提過(guò)程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))