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AsPC-1細(xì)胞,,AsPC-1細(xì)胞株的復(fù)蘇方法
產(chǎn)品名稱:AsPC-1細(xì)胞
中文名稱:導(dǎo)管癌細(xì)胞
貨號:AsPC-1
規(guī)格:1~3*106細(xì)胞/25cm2培養(yǎng)瓶
上海蒂科生物 細(xì)胞株,、血清、培養(yǎng)基,、 各種細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑,,開學(xué)酬賓*中,更多產(chǎn)品,,更大優(yōu)惠,,敬請!,!
一,、細(xì)胞復(fù)蘇的原則
在實際操作中,凍存細(xì)胞要進(jìn)行復(fù)蘇,,再培養(yǎng)傳代,。復(fù)蘇細(xì)胞一般采用快速融化法。以保證細(xì)胞外結(jié)晶快速融化,,以避免慢速融化水分滲入細(xì)胞內(nèi),,再次形成胞內(nèi)結(jié)晶損傷細(xì)胞。
二,、細(xì)胞復(fù)蘇的主要操作步驟
(1)佩戴眼鏡和手套,,從液氮罐中取出安瓿或冷凍管。
(2)迅速放入 38℃水浴中,,并不時搖動,,在1分鐘內(nèi)使其*融化,,然后在無菌下取出細(xì)胞。
(3)在1000r/min速度下離心5~10分鐘,,棄去上層液,,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,接種濃度1×109/L,,置37℃溫箱靜置培養(yǎng),,次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),,觀察生長情況,。若細(xì)胞密度較高,及時傳代,?;驘o需離心直接將細(xì)胞加入瓶中,并加入培養(yǎng)基貼壁培養(yǎng)12~24小時后,,充去上清,,換入新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
三,、注意事項
在細(xì)胞復(fù)蘇操作時,,應(yīng)注意融化凍存細(xì)胞速度要快,可不時搖動安瓿或冷凍管,,使之盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃),。這樣復(fù)蘇的凍存細(xì)胞存活率高,生長及形態(tài)良好,。然而,,由于凍存的細(xì)胞還受其他因素的影響,有時也會有部分細(xì)胞死亡,。此時,,可將不貼壁、飄浮在培養(yǎng)液上(已死亡)的細(xì)胞輕輕倒掉,,再補以適量的新培養(yǎng)液,,也會獲得較為滿意的結(jié)果。
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