AN3 CA細(xì)胞，AN3 CA細(xì)胞株的復(fù)蘇方法

產(chǎn)品名稱：AN3 CA細(xì)胞

中文名稱：星形細(xì)胞瘤細(xì)胞

貨號：AN3 CA

規(guī)格：1~3*106細(xì)胞/25cm2培養(yǎng)瓶

上海蒂科生物 細(xì)胞株,、血清,、培養(yǎng)基、 各種細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑,，開學(xué)酬賓*中,，更多產(chǎn)品，更大優(yōu)惠,，敬請?。?/span>

一,、細(xì)胞復(fù)蘇的原則

在實(shí)際操作中,，凍存細(xì)胞要進(jìn)行復(fù)蘇，再培養(yǎng)傳代,。復(fù)蘇細(xì)胞一般采用快速融化法,。以保證細(xì)胞外結(jié)晶快速融化，以避免慢速融化水分滲入細(xì)胞內(nèi),，再次形成胞內(nèi)結(jié)晶損傷細(xì)胞,。

二、細(xì)胞復(fù)蘇的主要操作步驟

（1）佩戴眼鏡和手套,，從液氮罐中取出安瓿或冷凍管,。

（2）迅速放入 38℃水浴中，并不時(shí)搖動,，在1分鐘內(nèi)使其*融化,，然后在無菌下取出細(xì)胞,。

（3）在1000r/min速度下離心5～10分鐘，棄去上層液,，加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,，接種濃度1×10⁹/L，置37℃溫箱靜置培養(yǎng),，次日更換一次培養(yǎng)液,，繼續(xù)培養(yǎng)，觀察生長情況,。若細(xì)胞密度較高,，及時(shí)傳代?；驘o需離心直接將細(xì)胞加入瓶中,，并加入培養(yǎng)基貼壁培養(yǎng)12～24小時(shí)后，充去上清,，換入新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。

三、注意事項(xiàng)

在細(xì)胞復(fù)蘇操作時(shí),，應(yīng)注意融化凍存細(xì)胞速度要快，可不時(shí)搖動安瓿或冷凍管,，使之盡快通過zui易受損的溫度段（-5～0℃）,。這樣復(fù)蘇的凍存細(xì)胞存活率高，生長及形態(tài)良好,。然而,，由于凍存的細(xì)胞還受其他因素的影響，有時(shí)也會有部分細(xì)胞死亡,。此時(shí),，可將不貼壁、飄浮在培養(yǎng)液上（已死亡）的細(xì)胞輕輕倒掉,，再補(bǔ)以適量的新培養(yǎng)液,，也會獲得較為滿意的結(jié)果。