YAPC細(xì)胞

貨    號：SUER1929（XR)

產(chǎn)品名稱：YAPC

細(xì)胞形態(tài)：上皮樣

傳代情況：P3-P5

產(chǎn)品規(guī)格：1~3*106細(xì)胞/25cm2培養(yǎng)瓶

YAPC細(xì)胞

培養(yǎng)條件：RPMI 1640+ 15% FBS

生長特性：貼壁生長

傳代方法：1:2~1：8傳代,；2-3天傳代一次,。1:3傳代,2-3天傳一代

生長條件：95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

YAPC細(xì)胞

對于貼壁細(xì)胞，若細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,，用75%酒精擦拭后平躺置于培養(yǎng)箱內(nèi)。次日觀察,，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底，表明細(xì)胞活力正常,，剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉,，換成新鮮的培養(yǎng)基；如細(xì)胞還不貼壁,，將細(xì)胞離心收集移到新的培養(yǎng)瓶中,，原培養(yǎng)瓶加部分新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察,，我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo),，直到問題解決。對于懸浮細(xì)胞：收到細(xì)胞后,，將細(xì)胞全部離心,，去掉舊的培養(yǎng)基，換成新鮮的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

特別注意：（如使用公共實驗室或者初次接觸,，建議添加雙抗培養(yǎng)）

貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天有少量或沒有飄忽的細(xì)胞可以當(dāng)天換液,，因為路途顛簸造成大量飄忽的情況時，請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,，請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)

收到細(xì)胞后請盡快更換為含10%血清的新鮮培養(yǎng)基,，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,，（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間zui長不宜超過72小時）

如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,，漏液等情況請及時做好照片記錄并SUER技術(shù)人員

細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項：

貼壁細(xì)胞生長緩慢；適當(dāng)提高血清濃度（zui高不能超過20%）,，或可根據(jù)該細(xì)胞生長特性生長密度,，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)

如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),，請將懸浮的細(xì)胞即時離心，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天,；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培養(yǎng)3天,。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時實驗室技術(shù)人員會跟進(jìn)解決

生長不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,，成島狀生長,，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞,，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)

細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴(yán)格遵照無菌操作）

吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時間,，通?？刂圃?-2min）

注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次）,，待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存

取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,，添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻,，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

鏡下觀察消化情況,，在細(xì)胞生長特性邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ粢让?，加6-8ml*培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層,，盡量把細(xì)胞層吹落,，吹散,。