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AU565細胞,,AU565細胞株的復蘇方法

時間:2017-2-9閱讀:1341

AU565細胞,AU565細胞株的復蘇方法

產(chǎn)品名稱:AU565細胞

貨號:AU565

規(guī)格:1~3*106細胞/25cm2培養(yǎng)瓶

上海蒂科生物 細胞株,、血清、培養(yǎng)基、 各種細胞培養(yǎng)相關試劑,,開學酬賓*中,更多產(chǎn)品,更大優(yōu)惠,,敬請?。?/span>

 

一,、細胞復蘇的原則

在實際操作中,,凍存細胞要進行復蘇,再培養(yǎng)傳代,。復蘇細胞一般采用快速融化法,。以保證細胞外結晶快速融化,以避免慢速融化水分滲入細胞內(nèi),,再次形成胞內(nèi)結晶損傷細胞,。

二、細胞復蘇的主要操作步驟

(1)佩戴眼鏡和手套,,從液氮罐中取出安瓿或冷凍管,。

(2)迅速放入 38℃水浴中,并不時搖動,,在1分鐘內(nèi)使其*融化,,然后在無菌下取出細胞。

(3)在1000r/min速度下離心5~10分鐘,,棄去上層液,,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,接種濃度1×109/L,,置37℃溫箱靜置培養(yǎng),,次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),,觀察生長情況,。若細胞密度較高,及時傳代,?;驘o需離心直接將細胞加入瓶中,并加入培養(yǎng)基貼壁培養(yǎng)12~24小時后,,充去上清,,換入新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

三,、注意事項

在細胞復蘇操作時,,應注意融化凍存細胞速度要快,可不時搖動安瓿或冷凍管,,使之盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃),。這樣復蘇的凍存細胞存活率高,,生長及形態(tài)良好。然而,,由于凍存的細胞還受其他因素的影響,,有時也會有部分細胞死亡。此時,,可將不貼壁,、飄浮在培養(yǎng)液上(已死亡)的細胞輕輕倒掉,再補以適量的新培養(yǎng)液,,也會獲得較為滿意的結果,。

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