液相色譜儀（liquid chromatograph）是用液相色譜法對物質(zhì)進行定性,、定量分析的儀器。根據(jù)固定相是液體或是固體,，又分為液-液色譜(llc)及液-固色譜(lsc)?，F(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統(tǒng),、溫度控制系統(tǒng),、色譜柱、檢測器,、信號記錄系統(tǒng)等部分組成,。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較，具有,、快速,、靈敏等特點。
系統(tǒng)由儲液器,、泵,、進樣器、色譜柱,、檢測器,、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運動時,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來液相色譜儀主要有進樣系統(tǒng),、輸液系統(tǒng),、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),，下面將分別敘述其各自的組成與特點,。
1．進樣系統(tǒng)
液相色譜儀一般采用隔膜注射進樣器或高壓進樣間完成進樣操作，進樣量是恒定的,。這對提高分析樣品的重復(fù)性是有益的,。
2．輸液系統(tǒng)
該系統(tǒng)包括高壓泵、流動相貯存器和梯度儀三部分,。高壓泵的一般壓強為l．47～4．4x10pa,，流速可調(diào)且穩(wěn)定，當高壓流動相通過層析柱時,，可降低樣品在柱中的擴散效應(yīng),，可加快其在柱中的移動速度，這對提高分辨率,、回收樣品,、保持樣品的生物活性等都是有利的,。流動相貯存器和梯度儀,，可使流動相隨固定相和樣品的性質(zhì)而改變,，包括改變洗脫液的極性、離子強度,、ph值,，或改用競爭性抑制劑或變性劑等。這就可使各種物質(zhì)(即使僅有一個基團的差別或是同分異構(gòu)體)都能獲得有效分離,。
3.分離系統(tǒng)
該系統(tǒng)包括色譜柱,、連接管和恒溫器等。色譜柱一般長度為10～50cm(需要兩根連用時,，可在二者之間加一連接管),，內(nèi)徑為2～5mm，由"不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成,，住內(nèi)裝有直徑為5～10μm粒度的固定相(由基質(zhì)和固定液構(gòu)成)．固定相中的基質(zhì)是由機械強度高的樹脂或硅膠構(gòu)成,，它們都有惰性(如硅膠表面的硅酸基因基本已除去)、多孔性(孔徑可達1000)和比表面積大的特點,，加之其表面經(jīng)過機械涂漬(與氣相色譜中固定相的制備一樣),，或者用化學法偶聯(lián)各種基因(如磷酸基、季胺基,、羥甲基,、苯基、氨基或各種長度碳鏈的烷基等)或配體的有機化合物,。因此,，這類固定相對結(jié)構(gòu)不同的物質(zhì)有良好的選擇性。例如,，在多孔性硅膠表面偶聯(lián)豌豆凝集素(psa)后,，就可以把成纖維細胞中的一種糖蛋白分離出來。
另外,，固定相基質(zhì)粒小,，柱床極易達到均勻、致密狀態(tài),，極易降低渦流擴散效應(yīng),。基質(zhì)粒度小,，微孔淺,，樣品在微孔區(qū)內(nèi)傳質(zhì)短。這些對縮小譜帶寬度,、提高分辨率是有益的,。根據(jù)柱效理論分析,，基質(zhì)粒度小，塔板理論數(shù)n就越大,。這也進一步證明基質(zhì)粒度小,，會提高分辨率的道理。再者,，液相色譜的恒溫器可使溫度從室溫調(diào)到60c,，通過改善傳質(zhì)速度，縮短分析時間,，就可增加層析柱的效率,。
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