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　　DNA合成儀 -在生物學中的應用

　　

　　DNA合成儀在分子生物學領(lǐng)域中的應用非常廣泛，大體可以概括為以下幾個方面,。

　　

　　1．合成PCR引物,，DNA測序引物和雜交探針

　　

　　2．合成生物素標記的DNA包括生物素標記的引物

　　

　　用于DNA固相測序法(solid-phasesequencing)，采用生物素標記的引物進行PCR擴增,，再用抗生物素蛋白釣出擴增產(chǎn)物,，由于抗生物素蛋白與磁珠共價結(jié)合，所以用磁鐵吸附即可釣出擴增產(chǎn)物,，大大簡化了DNA測序模板的純化步驟,。此外，生物素標記的探針用于非放射性雜交檢測,。DNA合成儀可用于合成生物素標記的探針和引物,。

　　

　　3．合成熒光素標記的DNA包括熒光素標記的引物

　　

　　可在合成的DNA片段5’端標記幾種不同顏色熒光素(6-FAM、TET,、HEX),，用于全自動DNA測序儀，還可用于PCR片段大小分析及定量分析,，即基因組型分析和基因表達水平的研究,。此外熒光素標記的探針用于原位PCR雜交檢測，進行基因在染色體上的定位,。而熒光素標記的DNA包括熒光素標記的引物皆可采用DNA合成儀進行合成,。

　　

　　4．合成反義核酸

　　

　　反義核酸可用于反義調(diào)控和基因治療。反義調(diào)控指在體外合成與靶序列互補的DNA片段,，轉(zhuǎn)化細胞后與靶序列結(jié)合,，即在轉(zhuǎn)錄水平上抑制基因表達，但由于細胞內(nèi)存在限制酶系統(tǒng)會把外源核酸降解,，所以反義核酸要經(jīng)硫化修飾后再轉(zhuǎn)化細胞,。另外癌癥、艾滋病等也可采用反義核酸進行基因水平的治療,。DNA合成儀是合成反義核酸的儀器,。

　　

　　5．合成磷酸標記的DNA

　　

　　用DNA連接酶把合成的磷酸標記的DNA片段連接起來，在體外進行基因構(gòu)建,。磷酸標記的DNA常用DNA合成儀來合成,。

　　

　　6．合成RNA

　　

　　用DNA合成儀合成的RNA主要用于核酶研究,，核酶可作為生物導彈轉(zhuǎn)化到細胞中,，定點切割有病基因，如癌基因等,。