聯(lián)系電話
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級(jí)會(huì)員·13年您現(xiàn)在的位置： 翌圣生物科技（上海）股份有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)>>細(xì)胞凋亡與吞噬>> 40304ES20Annexin V-Alexa Fluor 647/PI 檢測(cè)試劑盒
40304ES20Annexin V-Alexa Fluor 647/PI 檢測(cè)試劑盒
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 40304ES20 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù)：1008更新時(shí)間：2022-04-11 15:07:40
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,，謝謝!
- 聯(lián)系人：
- 曹女士
- 電話：
- 400-6111-883
- 手機(jī)：
- 售后：
- 4006-111-883
- 傳真：
- 86-21-34615995
- 地址：
- 上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號(hào)3樓
- 網(wǎng)址：
- www.yeasen.com
掃一掃訪問(wèn)手機(jī)商鋪
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 20T |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | 40304ES20 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品編號(hào)
規(guī)格
價(jià)格（元）
*（元）
Annexin V-Alexa Fluor 647/PI Apoptosis Detection Kit
Annexin V-Alexa Fluor 647/PI 檢測(cè)試劑盒
40304ES20
20 T
518.00
386.00
40304ES50
50 T
1120.00
786.00
40304ES60
100 T
1960.00
1346.00
產(chǎn)品描述
Annexin V-Alexa Fluor 647/PI 檢測(cè)試劑盒（Annexin V-Alexa Fluor647/PI Apoptosis Detection Kit）是用Alexa Fluor647標(biāo)記了的Annexin V作為探針,，來(lái)檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的發(fā)生,，可用流式細(xì)胞儀或其他熒光檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行檢測(cè),。
其檢測(cè)原理為：在正常的活細(xì)胞中,，磷脂酰絲氨酸（phosphotidylserine,，PS）位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè),，但在早期凋亡的細(xì)胞中，PS 從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面,，暴露在細(xì)胞外環(huán)境中,。Annexin V（膜聯(lián)蛋白-V）是一種分子量為35-36KD的Ca2+ 依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與PS高親和力結(jié)合,。可通過(guò)細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合,。
另外，本試劑盒中還提供了碘化丙啶（Propidium Iodide,，PI）用來(lái)區(qū)分存活的早期細(xì)胞和壞死或晚期凋亡細(xì)胞,。PI是一種核酸染料，它不能透過(guò)正常細(xì)胞或早期凋亡細(xì)胞的完整的細(xì)胞膜,，但可以透過(guò)凋亡晚期和壞死細(xì)胞的細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅,。因此，將Annexin V與PI聯(lián)合使用時(shí),，PI 則被排除在活細(xì)胞（Annexin V-/PI-）和早期凋亡細(xì)胞（Annexin V+/PI-）之外,，而晚期凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞同時(shí)被Alexa Fluor647 和PI 結(jié)合染色呈現(xiàn)雙陽(yáng)性（Annexin V+/PI+）。
本試劑盒需要使用流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè),。
產(chǎn)品組分組分編號(hào)
組分名稱
產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格
40304ES20（20T）
40304ES50（50T）
40304ES60（100T）
40304-A
Annexin V-Alexa Fluor647
100 μL
250 μL
500 μL
40304-B
PI Staining Solution (20 μg/mL)
200 μL
500 μL
1.0 mL
40304-C
1×Binding Buffer
10 mL
25 mL
50 mL
運(yùn)輸與保存方法
冰袋（wet ice）運(yùn)輸,。-20 ℃避光保存，避免反復(fù)凍融,，一年有效期,。
【注】：如果需要在短時(shí)間內(nèi)多次重復(fù)使用，可以在4 ℃避光保存,，半年有效期,。
注意事項(xiàng)
1、由于細(xì)胞凋亡是一個(gè)快速的過(guò)程,，建議樣品在染色后1小時(shí)之內(nèi)進(jìn)行分析,。
2、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，消化是一個(gè)關(guān)鍵步驟,。貼壁細(xì)胞誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡時(shí)如有漂浮細(xì)胞,，需收集漂浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞后合并染色。處理貼壁細(xì)胞時(shí)要小心操作,，盡量避免人為的損傷細(xì)胞,。胰酶消化時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞需要用力吹打才能脫落,，容易造成細(xì)胞膜的損傷,，PI攝入過(guò)多；消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),，細(xì)胞膜同樣易造成損傷,，甚至?xí)绊懠?xì)胞膜上磷脂酰絲氨酸與Annexin V-Alexa Fluor647的結(jié)合。消化時(shí)將胰酶鋪滿孔板底后,，輕搖時(shí)胰酶與細(xì)胞充分接觸,，然后倒掉大部分胰酶，利用剩余的少量胰酶再消化一段時(shí)間,，待細(xì)胞間空隙增大,，瓶底呈花斑狀即可終止。在消化液中盡量不用EDTA,，EDTA會(huì)影響Annexin V與PS的結(jié)合,。
3、如果樣品來(lái)源于血液,，請(qǐng)務(wù)必除去血液中的血小板,。因?yàn)檠“搴?/span>PS，能與Annexin V結(jié)合,，從而干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。可以使用含有EDTA的緩沖劑并在200 g離心洗去血小板。
4,、試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開蓋時(shí)液體灑落,。
5,、Annexin V-Alexa Fluor647和PI是光敏物質(zhì)，在操作時(shí)請(qǐng)注意避光,。
6,、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。
7,、本產(chǎn)品僅作科研用途！
使用說(shuō)明
1,、 樣品染色
1.1,、懸浮細(xì)胞：300 g，4℃離心5 min收集細(xì)胞,。
貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的胰酶消化后,，300 g，4℃離心5 min收集細(xì)胞,。胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),，以防引起假陽(yáng)性。1.2,、用預(yù)冷的PBS洗滌細(xì)胞2次,，每次均需300g，4℃離心5 min,。
1.3,、吸棄PBS，加入100 μL 1×Binding Buffer重懸細(xì)胞,。
1.4,、加入5μL Annexin V-Alexa Fluor 647和10 μL PI，輕輕混勻,。
1.5,、避光、室溫反應(yīng)15 min,。
1.6,、加入400 μL 1×Binding Buffer，混勻后放置于冰上,，樣品在1小時(shí)內(nèi)用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡檢測(cè),。
【注】：為了避免洗滌細(xì)胞時(shí)損失細(xì)胞，在吸液時(shí)可以用大的Tip頭套上小的Tip頭吸液,。
2,、流式細(xì)胞儀分析
Alexa Fluor647最大激發(fā)波長(zhǎng)為651 nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)為667 nm,；PI-DNA復(fù)合物的最大激發(fā)波長(zhǎng)為535 nm,，最大發(fā)射波長(zhǎng)為615 nm。用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot）,，Alexa Fluor647為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo),。每個(gè)樣采集10,000 events,。
HB220222
相關(guān)產(chǎn)品
