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40305ES20AnnexinV-Alexa Fluor488/PI細(xì)胞凋亡檢測(cè)
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 40305ES20 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪(fǎng)問(wèn)次數(shù)：1090更新時(shí)間：2022-11-07 15:31:54
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 20 T |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | 40305ES20 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） | *（元） |
Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit Annexin V-Alexa Fluor 488/PI細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 | 40305ES20 | 20 T | 518.00 | 386.00 |
40305ES50 | 50 T | 1120.00 | 786.00 | |
40305ES60 | 100 T | 1960.00 | 1346.00 |
產(chǎn)品描述
Annexin V-Alexa Fluor488/PI細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V-Alexa Fluor488/PI Apoptosis Detection Kit）是用Alexa Fluor488標(biāo)記了的Annexin V作為探針，來(lái)檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的發(fā)生,，可用流式細(xì)胞儀或其他熒光檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行檢測(cè)。
其檢測(cè)原理為：在正常的活細(xì)胞中，磷脂酰絲\氨酸（phosphotidylserine,，PS）位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)，但在早期凋亡的細(xì)胞中,，PS從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面,，暴露在細(xì)胞外環(huán)境中。Annexin-Ⅴ（膜聯(lián)蛋白-V）是一種分子量為35-36 KD的Ca2+依賴(lài)性磷脂結(jié)合蛋白,，能與PS高親和力結(jié)合,。可通過(guò)細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲\氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。
另外,，本試劑盒中還提供了碘化丙啶（Propidium Iodide,，PI）用來(lái)區(qū)分存活的早期細(xì)胞和壞死或晚期凋亡細(xì)胞,。PI是一種核酸染料，它不能透過(guò)正常細(xì)胞或早期凋亡細(xì)胞的完整的細(xì)胞膜,，但可以透過(guò)凋亡晚期和壞死細(xì)胞的細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅,。因此，將Annexin V與PI聯(lián)合使用時(shí),，PI 則被排除在活細(xì)胞（Annexin V-/PI-）和早期凋亡細(xì)胞（Annexin V+/PI-）之外,，而晚期凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞同時(shí)被Alexa Fluor488 和PI 結(jié)合染色呈現(xiàn)雙陽(yáng)性（Annexin V+/PI+）。
產(chǎn)品組分
編號(hào) | 組分 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | ||
40305ES20（20T） | 40305ES50（50T） | 40305ES60（100T） | ||
40305-A | Annexin V-Alexa Fluor488 | 100 μL | 250 μL | 500 μL |
40305-B | PI Staining Solution (20 μg/mL) | 200 μL | 500 μL | 1.0 mL |
40305-C | 1×Binding Buffer | 10 mL | 25 mL | 50 mL |
運(yùn)輸與保存方法
冰袋（wet ice）運(yùn)輸,。-20 ℃避光長(zhǎng)期保存,，避免反復(fù)凍融，一年有效,。
【注】：如果需要在短時(shí)間內(nèi)多次重復(fù)使用,，可以在4 ℃避光保存，半年有效,。
注意事項(xiàng)
1）由于細(xì)胞凋亡是一個(gè)快速的過(guò)程,，建議樣品在染色后1小時(shí)之內(nèi)進(jìn)行分析。
2）對(duì)于貼壁細(xì)胞,，消化是一個(gè)關(guān)鍵步驟,。貼壁細(xì)胞誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡時(shí)如有漂浮細(xì)胞，需收集漂浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞后合并染色,。處理貼壁細(xì)胞時(shí)要小心操作,，盡量避免人為的損傷細(xì)胞。胰\酶消化時(shí)間過(guò)短,，細(xì)胞需要用力吹打才能脫落,，容易造成細(xì)胞膜的損傷，PI攝入過(guò)多,；消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),，細(xì)胞膜同樣易造成損傷，甚至?xí)绊懠?xì)胞膜上磷脂酰絲\氨酸與Annexin V-Alexa Fluor488的結(jié)合,。消化時(shí)將胰\酶鋪滿(mǎn)孔板底后,，輕搖時(shí)胰\酶與細(xì)胞充分接觸，然后倒掉大部分胰\酶,，利用剩余的少量胰\酶再消化一段時(shí)間,，待細(xì)胞間空隙增大，瓶底呈花斑狀即可終止,。在消化液中盡量不用EDTA,，EDTA會(huì)影響Annexin V與PS的結(jié)合。
3）如果樣品來(lái)源于血液，請(qǐng)務(wù)必除去血液中的血小板,。因?yàn)檠“搴蠵S,，能與Annexin V結(jié)合，從而干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果,?？梢允褂煤蠩DTA的緩沖劑并在200 g離心洗去血小板。
4）試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,，避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
5）Annexin V-Alexa Fluor488和PI是光敏物質(zhì),，在操作時(shí)請(qǐng)注意避光,。
6）本產(chǎn)品僅作科研用途！
使用說(shuō)明
1.1 樣品染色
1. 懸浮細(xì)胞：300 g,，4 ℃離心5 min收集細(xì)胞,。
貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的胰\酶消化后，300 g,，4 ℃離心5 min收集細(xì)胞。胰\酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),，以防引起假陽(yáng)性,。
2. 用4 ℃預(yù)冷的PBS洗滌細(xì)胞2次，每次均需300 g,，4 ℃離心5 min,。
3. 吸棄PBS，加入100 μL 1×Binding Buffer重懸細(xì)胞,。
4. 加入5 μL Annexin V-Alexa Fluor 488和10 μL PI,，輕輕混勻。
5. 避光,、室溫反應(yīng)10-15 min,。
6. 加入400 μL 1×Binding Buffer，混勻后放置于冰上,，樣品在1小時(shí)內(nèi)用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡檢測(cè),。
【注】：為了避免洗滌細(xì)胞時(shí)損失細(xì)胞，在吸液時(shí)可以用大的Tip頭套上小的Tip頭吸液,。
1.2 流式細(xì)胞儀分析
Alexa Fluor488最大激發(fā)波長(zhǎng)為488 nm,，最大發(fā)射波長(zhǎng)為519 nm；PI-DNA復(fù)合物的最大激發(fā)波長(zhǎng)為535 nm,，最大發(fā)射波長(zhǎng)為615 nm,。用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），Alexa Fluor488為橫坐標(biāo),，PI為縱坐標(biāo),。每個(gè)樣采集10,000 events。
1.3 熒光顯微鏡分析
1) 滴一滴用Annexin V-FITC/PI雙染的細(xì)胞懸液于載玻片上,，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞,。
2) 在熒光顯微鏡下用雙色濾光片觀察。Annexin V-FITC熒光信號(hào)呈綠色,，PI熒光信號(hào)呈紅色,。
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱(chēng) | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit Annexin V-Alexa Fluor 488/PI 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 | 40305ES20 | 20 T | 518.00 |
40305ES50 | 50 T | 1120.00 | |
40305ES60 | 100 T | 1960.00 | |
TUNEL Apoptosis Detection Kit (FITC) TUNEL 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（FITC） | 40306ES20* | 20T | 1178.00 |
40306ES50* | 50T | 2680.00 | |
40306ES60* | 100T | 4080.00 | |
TUNEL Apoptosis Detection Kit (Alexa Fluor 488) TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Alexa Fluor 488） | 40307ES20* | 20T | 1250.00 |
40307ES50* | 50T | 3080.00 | |
40307ES60* | 100T | 4800.00 | |
TUNEL Apoptosis Detection Kit (Alexa Fluor 640) TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Alexa Fluor 640） | 40308ES20* | 20T | 1250.00 |
40308ES50* | 50T | 3080.00 | |
40308ES60* | 100T | 4800.00 | |
Annexin V-PE/7-AAD細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit | 40310ES20* | 20T | 480.00 |
40310ES50* | 50T | 960.00 | |
40310ES60* | 100T | 1680.00 |
HB211027
