聯(lián)系電話
上海北諾生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員·14年
- 聯(lián)系人：
- 周經(jīng)理 劉經(jīng)理
- 電話：
- 021-57730393
- 手機(jī)：
- 15800960770
- 傳真：
- 86-021-61496710
- 地址：
- 上海市徐匯區(qū)宜山路520號(hào)中華門大廈18樓D座
- 個(gè)性化：
- www.bnbiotech.com
- 網(wǎng)址：
- www.bnbiotech.com
掃一掃訪問手機(jī)商鋪
實(shí)驗(yàn)試劑
1. 使用前，將RNase A全部加入Solution I中并于4度保存。
2. 按下表用無水乙醇稀釋DNA Wash Buffer，并于室溫保存。
D6948-00B: 加入8ml無水乙醇
D6948-01B: 加入80ml無水乙醇
D6848-02B: 加入80ml無水乙醇
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 取1.5-5ml 菌液10，000 x g室溫離心1min收集菌體沉淀,；
2. 小心去除上清液，加250ul Solution I/RNase,，渦旋或用移液槍上下吹打重懸菌體,。
3. 加250ul SolutionⅡ，來回顛倒4- 6次輕柔混勻,，得到澄清的裂解液,。
4. 加125ul Buffer N3，顛倒混勻幾次直至出現(xiàn)白色絮狀沉淀,，室溫放置2-3min讓其充分反應(yīng),。
5. 12，000×g 室溫或4℃離心10min得上清,，把上清轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的離心管內(nèi),；
6. 加入與上清等體積的ETR Binding Buffer，顛倒混勻7-10次,，室溫放置5min,。
7. 結(jié)合質(zhì)粒——把結(jié)合柱插入2ml收集管,，每次轉(zhuǎn)移700ul混合液至結(jié)合柱柱里,，8,，000×g離心1min，棄濾液,。
8. 重復(fù)第7步,，直至所有上清都過濾完，棄濾液,。
9. 加入500ul ETR Wash Buffer到結(jié)合柱上，8,，000×g離心1min,，使全部液體濾過柱子，棄濾液,。
10. 加入500ul Buffer EHB到結(jié)合柱上,，8，000×g離心1min,，使全部液體濾過柱子,，棄濾液；
11. 加入700ul DNA Wash Buffer到結(jié)合柱上,， 8,，000×g離心1min使全部液體濾過柱子，棄濾液,；
注意：濃縮的DNA Wash Buffer在使用之前必須按標(biāo)簽的提示用無水乙醇稀釋,。
12. 加入700ul DNA Wash Buffer到結(jié)合柱上，8,，000×g離心1min使全部液體濾過柱子,，棄濾液；
13. 把空柱子套回離心管,，zui大轉(zhuǎn)速（不超過13,，0 0 0×g）離心2min干燥柱子；
14. 把結(jié)合柱套在一個(gè)新的1.5ml離心管中,，加入30-50ul Endotoxin-Free Elution Buffer,，室溫放置2-5min，zui高轉(zhuǎn)速離心1min洗脫質(zhì)粒DNA,。
