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細(xì)菌內(nèi)毒素(Endotoxin),,是革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁外壁層上的*結(jié)構(gòu),,它在細(xì)菌生長、繁殖過程中,,并不分泌到介質(zhì)中,,也不能從外壁層上自然脫落,,它不是細(xì)菌的代謝產(chǎn)物,當(dāng)細(xì)菌死亡解體后,,才顯示出一系列的內(nèi)毒素生物活性,。
細(xì)菌內(nèi)毒素的化學(xué)結(jié)構(gòu)是脂多糖和微量蛋白的復(fù)合物,脂多糖由三部分組成:O-特異性鏈,、核心多糖和類脂A三部分組成,。
O-特異性鏈:向外由若干個低聚糖的重復(fù)單位組成的多糖鏈,具有特異性,。
核心多糖:分為內(nèi)核心及外核心,,外核心由數(shù)種單糖,包括葡萄糖,、半乳糖,、乙酰氨基葡萄糖等組成。內(nèi)核心含有庚糖及特殊的KDO(3-脫氧-D-甘露糖-辛酮糖),。KDO以耐酸的酮糖鍵與類脂A的氨基葡萄糖連接,。所有G-菌都有此結(jié)構(gòu)。
類脂A:位于zui外層,,是以脂化的葡萄糖胺二糖為單位,,通過焦磷酸鍵組成的一種*的糖脂化合物,具有致熱作用,,是革蘭氏陰性細(xì)菌內(nèi)毒素的毒性成分,。游離的類脂A可自身凝集成高分子的復(fù)合物,其分子量大小不等,。游離的類脂A含有疏水性的中心及親水性的邊緣,,是一種雙相分子。
內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品是從大腸桿菌E.ColiO111B4菌株的細(xì)胞壁提取精制而成,。細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水溶解后,,內(nèi)毒素的疏水性中心相互結(jié)合形成大分子復(fù)合體,而難溶于水,?!都?xì)菌內(nèi)毒素檢查法》要求“將細(xì)菌內(nèi)毒素國家標(biāo)準(zhǔn)品或細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水溶解后在旋渦混合器上混勻15分鐘,每稀釋一步均應(yīng)在旋渦混合器上混勻30秒鐘,。" 在旋渦混合器上混勻15分鐘的目的是借助外力破壞這種分子復(fù)合體,,使內(nèi)毒素均勻的分布在水溶液中,保證試驗結(jié)果的真實準(zhǔn)確,。如果沒有旋渦混合器或混勻時間不夠,,均會導(dǎo)致細(xì)菌內(nèi)毒素分子復(fù)合體,這種溶質(zhì)不能分散在溶媒中,,而影響試驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,。