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細(xì)胞技術(shù)專題:細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)

2014-2-18  閱讀(957)

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材料:

6孔板

marker筆

直尺

20微升槍頭(滅菌)

無血清培養(yǎng)基

PBS

準(zhǔn)備:

所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺內(nèi))

流程:

1,、先用marker筆在6孔板背后,,用直尺比著,均勻地劃橫線,,大約每隔0.5~1cm一道,,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線,。

2,、在空中加入約5X105個(gè)細(xì)胞,具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同,,掌握為夜能鋪滿,。

3、第二天用槍頭比著直尺,,盡量垂直于背后的橫線劃痕,,槍頭要垂直,不要傾斜,。

4,、用PBS洗細(xì)胞3次,,去除劃下的細(xì)胞,加入無血清培養(yǎng)基,。

5,、放入37℃5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。按0,、6,、12、24小時(shí)取樣,,拍照,。

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