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細(xì)胞技術(shù)專題:細(xì)胞劃痕實驗

2014-2-18  閱讀(1032)

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材料:

6孔板

marker筆

直尺

20微升槍頭(滅菌)

無血清培養(yǎng)基

PBS

準(zhǔn)備:

所有能滅菌的器械都要滅菌,,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺內(nèi))

流程:

1,、先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,,均勻地劃橫線,,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔,。每孔至少穿過5條線,。

2、在空中加入約5X105個細(xì)胞,,具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同,,掌握為夜能鋪滿。

3,、第二天用槍頭比著直尺,,盡量垂直于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,,不要傾斜,。

4、用PBS洗細(xì)胞3次,,去除劃下的細(xì)胞,,加入無血清培養(yǎng)基。

5,、放入37℃5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng),。按0、6,、12,、24小時取樣,拍照,。

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