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【原理】
瓊脂糖（agarose）是經(jīng)過挑選,，以質(zhì)地較純的瓊脂（agar）作為原料而制成的,。瓊脂在化學上是由瓊脂糖和瓊脂膠組成的復合物,。瓊脂膠是一含有硫酸根和羥基的多糖,，它具有離子交換性質(zhì)，這種性質(zhì)會給電泳及凝膠過濾以不良的影響,。瓊脂糖是直鏈多糖,，它由D－半乳糖和3,6－脫水－L－半乳糖的殘基交替排列組成。
瓊脂糖主要通過氫鍵而形成凝膠,。電泳時因凝膠含水量大（98－99%）,，近似自由電泳,，因為固體支持物的影響少,，故電泳速度快，區(qū)帶整齊,。而且由于瓊脂糖不含帶電荷的基團,，電滲影響很少，是一種較好的電泳材料,，分離效果較好,。
血清中脂類物質(zhì)與血清載脂蛋白結合成水溶性的脂蛋白（lipoprotein）形式存在。各種脂蛋白中所含載脂蛋白的種類及數(shù)量不同，各種脂蛋白顆粒大小也相差很大,，因此,，以瓊脂糖凝膠為支持物，在電場中可使各種脂蛋白顆粒分離開來,。
瓊脂糖凝膠電泳分離血清蛋白方法簡單,。將血清脂蛋白用脂類染料蘇丹黑（或油紅等）進行預染。再將預染過的血清加樣于瓊脂糖凝膠板加樣槽中,，通電后可以看到脂蛋白向正極移動,，并分離出幾個區(qū)帶。
正常人血清脂蛋白可出現(xiàn)三條區(qū)帶,，從陰極到陽極依次為β－脂蛋白（zui深）,，前β－脂蛋白（zui淺）及α－脂蛋白（比前β－脂蛋白略深些），在原點處應無乳糜微粒,。有時前β－脂蛋白也顯示不出來,。
瓊脂糖主要通過氫鍵而形成凝膠。電泳時因凝膠含水量大（98－99%）,，近似自由電泳,，因為固體支持物的影響少，故電泳速度快,，區(qū)帶整齊,。而且由于瓊脂糖不含帶電荷的基團，電滲影響很少,，是一種較好的電泳材料,，分離效果較好。
血清中脂類物質(zhì)與血清載脂蛋白結合成水溶性的脂蛋白（lipoprotein）形式存在,。各種脂蛋白中所含載脂蛋白的種類及數(shù)量不同,，各種脂蛋白顆粒大小也相差很大，因此,，以瓊脂糖凝膠為支持物,，在電場中可使各種脂蛋白顆粒分離開來。
瓊脂糖凝膠電泳分離血清蛋白方法簡單,。將血清脂蛋白用脂類染料蘇丹黑（或油紅等）進行預染,。再將預染過的血清加樣于瓊脂糖凝膠板加樣槽中，通電后可以看到脂蛋白向正極移動,，并分離出幾個區(qū)帶,。
正常人血清脂蛋白可出現(xiàn)三條區(qū)帶，從陰極到陽極依次為β－脂蛋白（zui深）,，前β－脂蛋白（zui淺）及α－脂蛋白（比前β－脂蛋白略深些）,，在原點處應無乳糜微粒,。有時前β－脂蛋白也顯示不出來。
【操作】
1,、預染血清血清0.2ml中加蘇丹黑染色液0.2ml,，混合置37℃水浴中染色30分鐘，離心（2000轉(zhuǎn)/分）約5分鐘,。以除去懸浮于血清中染料沉渣,。
2、制備瓊脂糖凝膠板將已配制好的0.5%瓊脂糖凝膠于沸水浴中加熱融化,，用吸管吸取凝膠溶液澆注在載玻片上,，約3 ml。靜置半小時后凝固（天熱時需延長,，也可放入冰箱中數(shù)分鐘以加速凝固）,。
3、點樣將剪好的濾紙條對折,，以折邊在距凝膠一端2cm處切一點樣口,。將毛細管插入預染好的血清中，待吸入部分血清后,，取毛細管使其有樣品的一端靠于點樣口端部,，停靠3秒左右,。
4,、電泳將凝膠板平放入電泳槽中，使加樣端接在陰極一側(cè),，用四層濾紙或紗布做成“引橋”,，敷于膠板的兩端，各搭住凝膠板約1cm左右,，“引橋”的另一端浸于電泳槽內(nèi)的巴比妥緩沖液中,。接通電源，首先調(diào)節(jié)電流為3-4mA/凝膠板,，電泳10－15分鐘,；然后調(diào)節(jié)電流為6-7mA/凝膠板，電泳30－40分鐘,，即可觀察到分離的區(qū)帶,。
5、如果需要保留電泳圖譜,，可將電泳后的凝膠板（連同載玻片）放入清水中浸泡脫鹽2小時,，然后放烘箱（80℃左右）中烘干即可,。
【試劑】
1,、蘇丹黑染色液將蘇丹黑B加到無水乙醇中至飽和,，搖蕩使乙酰化,。用前過濾,。
2、巴比妥緩沖液稱取巴比妥鈉15.4g,、巴比妥2.76g及EDTA0.29g,，加水溶解后再加蒸餾水至1000ml（pH為8.6，離子強度0.075）,，為電極緩沖液,。
3、凝膠緩沖液取三羥甲基氨基甲烷1.212g,、EDTA0.29g及NaCl5.85g,，用蒸餾水溶解后，稀釋至1000ml,，pH為8.6,。
4、瓊脂糖凝膠稱取瓊脂糖0.45 g溶于50 ml凝膠緩沖液中,，再加水50 ml,。在水浴中加熱至沸，待瓊脂糖*溶解后,，立即停止加熱,。
【注意事項】
1、電泳樣品應為新鮮的空腹血清,。
2,、加熱溶化瓊脂時，須防止水份蒸發(fā)過多,。瓊脂糖凝膠隨用隨制,，以免凝膠表面干燥，影響分離效果,。
3,、制作凝膠板時瓊脂糖濃度一般選用0.5%左右為宜，高于1%以上α－脂蛋白部分較緊密,，β和前β－脂蛋白部分不夠清晰,；低于4.5%則凝固性較差，圖譜不清,。
4,、點樣口要大小適宜，邊緣整齊,、光滑,，否則會影響電泳圖譜,。
5、在α－脂蛋白前若出現(xiàn)較淺區(qū)帶,，可列為前α－脂蛋白,。
【正常參考范圍】
α－脂蛋白 20~30%
β－脂蛋白 20~30%
前β－脂蛋白 0~28%
乳糜微粒（-）
