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做動物實驗,，zui先要做的事情就是要養(yǎng)好動物,。掌握好動物飼料、飲水及其生活環(huán)境,，這對于動物實驗的成功是zui基本的保證,。這是看似一個平常，但卻有著不少細節(jié)的問題,。為了本版廣大站友能在整體上提高對實驗動物飼養(yǎng)的認識,，做好動物實驗的*步，特此開設本貼討論動物飼養(yǎng)的問題,。希望大家能踴躍參與,，以更多的實例來充實,、豐富本貼。
擬分以下幾個方面來討論：
實驗動物的選擇概述
實驗動物如何辨雌雄
實驗動物的適應性飼養(yǎng)
實驗動物的飼料（普通飼料,、特殊飼料）
實驗動物的飲水
實驗動物的籠具
實驗動物的墊料
實驗動物的飼養(yǎng)環(huán)境
實驗動物的護理（造模后）
貼子中如有不當之處,，請大家不吝指出！
*,、實驗動物的選擇,。
實驗動物如何選擇？這個問題對于藥理和實驗動物專業(yè)的朋友來說,，不是難事,。但對于需要做動物實驗的其它專業(yè)的朋友來說，有時候會感到茫然,?；蛘邲]有自己的思考，照抄別人的做法,。對于這一部分站友,，我們不可能要求去系統(tǒng)學習《醫(yī)學實驗動物學》，但我們可以常備一本在身邊,。在需要用的時候翻一翻,，將會使你豁然開朗。因為書中比較詳細地介紹了常用實驗動物的解剖生理,、生物學習性等等,，zui主要的是它為你選擇什么樣的實驗動物提供了重要的參考,。
因此,，系統(tǒng)學習或者零星地翻閱《醫(yī)學實驗動物學》是保證合理選用實驗動物的基礎(chǔ)之一。再者就是要參考大量文獻,。在此,，我不想對這一問題全面展開，只是提幾點原則和方法,。
*,，做什么樣的實驗？什么動物適合本實驗,？ 做什么實驗,，這是選題時就確定好了的?？隙ㄊ墙?jīng)過論證的,。無需多講。 用什么樣的動物呢,？我想,，大多是參照文獻,，再結(jié)合自己對實驗動物的了解。選題之時就肯定閱讀過很多文獻了,，因此不會陌生,。如：做高血脂、動脈粥樣硬化,，我想大多數(shù)人會選擇大鼠,、兔子，也可以選金黃地鼠,、鵪鶉,，少數(shù)人會選小鼠，但我想用狗和猴的基本上不會有吧,。因為要選擇比較容易形成此疾病的動物,，且要易得。 所以,，對于不太熟悉的人來說,，要多看文獻，參考別人是如何選擇的,。就算是對動物比較了解,，系統(tǒng)學過這方面知識的，也要多看文獻,，綜合權(quán)衡,。切忌隨意地憑空想像。
第二,，采取什么樣的方法造模,？ 做動物實驗通常是要造模的。選擇什么樣的方式,？這要從實驗的目的及條件入手,。造糖尿病，可以用手術(shù),，也可以用藥物,。其中藥物有四氧嘧啶及鏈脲佐菌素（STZ）。后者用得較多,，且為認同,。而四氧嘧啶目前用得較少了。造模方法一是參照《藥理實驗方法學》,，二是參照文獻,。造模方法有時也決定了你的動物選擇。像做手術(shù)造動脈粥樣硬化,，我想用大鼠比小鼠來得方便吧,？
第三,，經(jīng)費承受能力如何？ 做實驗也要精打細算,。不可能為了所謂的高水平,、技術(shù)而不顧實驗室的條件。像做高脂動物模型,，假設經(jīng)費只有一萬多元,，一定要弄個敲除APoE基因的小鼠來做，恐怕沒人認同,。做一個簡單的鎮(zhèn)痛抗炎實驗,，你非得要用SPF實驗室，這也是不太實際的,，也是沒必要的,。就像一個剛剛能滿足溫飽的人突然要花上很多錢去國外旅游一樣，是不切實際的,。因此,，實驗經(jīng)費讓我們有時不能達到理想的狀態(tài)。但是,，科研并不一定是要用的技術(shù),、的動物，而是要能解決問題,。能用簡單的技術(shù),、普通的動物解決問題的，就不必去盲目追求更高,。過于理想化,、不考慮經(jīng)費問題，是不少研究生初涉實驗時的通病,。
第四,，多了解一下實驗中可能出現(xiàn)的問題,。有不少人做實驗時根本沒有考慮可能出現(xiàn)的失誤,，因而在實驗出現(xiàn)問題時茫然無措。即使是造同樣的疾病模型,，不同的動物表現(xiàn)可能有不一樣的地方,。要對這些問題有充分的了解，并要進行必要的預試,。要了解動物的習性,，并進行必要的護理。 因此,，在你決定了選擇何種動物,，以何種方式造模之后,，實際上，你就要對整個實驗過程有全面的計劃,，并對可能出現(xiàn)的問題有應對的措施,。
第二、實驗動物如何辨雌雄,？
這個問題應該是每個初涉動物實驗的人完*全掌握的,，是不容許有任何一點差錯的。 如何辯,？當然是看生殖器了,。一般大動物好辯，像狗,，猴等,；小動物及中等大小的體型的難辨一點，如：小鼠,、大鼠,、兔?？捎邢铝蟹椒▉龛b別：
1. 看肛門與生殖器之間的距離：雄性隔得遠,，雌性隔得近。雄的生殖器與肛門間有陰囊,，不過幼齡時不太明顯,。
2. 雄性陰莖朝頭的方向突出，可輕輕擠壓包皮使其露出而確認,。雌性較小時可見閉合的陰道口,，擠壓亦可張開。像兔,、豚鼠等,，陰莖短小，故較難辨認,。是擠壓生殖器以確認,。看得熟練了,，其實也不難,。生殖器處呈O型者，為公的,；生殖器處呈V型,，下端裂縫延至肛門者，為母的。這主是針對幼齡的動物而言,。
3. 看乳頭或睪丸,。成年的動物比較好辯認。母的有乳頭,，雄的有睪丸,。但在比較小的時候，乳頭,，睪丸并不是那么明顯的,。
辨雌雄的目的就是為了分籠飼養(yǎng)，避免雌雄同籠而交配,，無法進行實驗,。不過，即使是同性的放在一籠,，有些細節(jié)仍值得注意,。 說一個小插曲：本人有一次將兩批做實驗剩下的小鼠弄到一個籠里。結(jié)果發(fā)現(xiàn)大的小鼠不斷追逐小的小鼠,，且試圖交配,。一師妹在旁說，是不是我弄了只雌的進去了,？我仔細檢查了一下,，根本沒有弄錯。放回去,，過了一會兒又發(fā)現(xiàn)如此現(xiàn)象,。后來我想可能是因為大的小鼠（25ｇ～30ｇ）已*性成熟，在找不到雌性的情況下來追小的雄性小鼠（15ｇ～18ｇ）以獲得性的滿足,。這豈不成了“同性戀”,？因此，動物的日齡相差太大的不要放在同一個籠里,，以免發(fā)生上述現(xiàn)象,。當然，一般而言,，一個籠子養(yǎng)多個動物的主要是小鼠,、大鼠、豚鼠,、金黃地鼠等小動物,，像兔子,、狗一般都是一個籠子一只,。 剛開始一定要認真仔細地觀察，這樣會有一些經(jīng)驗。熟悉以后,，可以很迅速很準確的分出來,。對初學者而言，我建議用第2種方法予以確認,。 一般提供商將動物送來時,，都是已經(jīng)分好了雌雄的。但我們?nèi)砸H自進行確認,。一旦有一只混入異性群中,，可能給實驗帶來極大的影響，甚至前功盡棄,。
第２種方法的示意圖如下：（不僅是大,、小鼠，也適合于兔,、豚鼠等的性別鑒定）
第三 ,、 實驗動物的適應性飼養(yǎng)
所謂適應性喂養(yǎng)，是指實驗動物由繁殖地或供應商處搬到實驗動物房以后,，在實驗之前,，為了使之適應環(huán)境而喂養(yǎng)幾天的過程。這一過程非常重要,，卻往往不受人重視,。 這一過程一般至少為期三天，是一周,。
為什么要進行適應性喂養(yǎng),？
1. 因為動物從一個地方進入到新的環(huán)境之后，它們要自行調(diào)整一下,，才能適應,。就像中國隊員到外國踢足球要倒時差一樣，動物們也要調(diào)節(jié)調(diào)節(jié),。因為運輸,、轉(zhuǎn)移過程中，動物原有的自身節(jié)律受到了影響,，需要恢復或適應新的節(jié)律,。
2. 在適應性喂養(yǎng)期間可密切觀察動物是否健康？如果動物運來之時就帶有疾病,，則可能在此期間表現(xiàn)出來,。這讓我們對此有一個緩沖期。不至于拿有病的動物匆匆忙忙在做實驗,。雖然不是所有有病的動物都在這幾天看得出來,，但這幾天確實給了我們一個重要的參考,。
怎樣使之適應？
1. 配置好飼料,、飲水,、墊料，做好通風,，12h-12h明暗交替,。努力使之在“新家”舒服地過好日子。
2. 密切觀察其毛發(fā),、排泄物,、活動情況。這是考察動物是否有病的外在表現(xiàn),。
3. 注意與實驗室原有飼養(yǎng)的動物隔開一定的距離,。其它動物的聲音、排泄的氨對新來的動物有一定的影響,。 如發(fā)現(xiàn)動物有個別狀態(tài)不佳者,，應立即隔離，并分析原因,。有三分之一以上狀態(tài)不佳者,，高度懷疑動物有疾病。有死亡者,，高度懷疑此批動物有問題,。
適應性喂養(yǎng)，是保證實驗成功的前提之一,。在此期間發(fā)現(xiàn)動物有病者,，應更換別的批次動物。也有的是實驗動物體重尚達不到實驗所要求的大小,，這種情況下可適當延長適應性喂養(yǎng)的時間,。
第四、實驗動物的飼料,。
飼料是一個很重要的方面,。我們要了解常用實驗動物基本的飼料組成。同時,，也要了解造一些疾病模型所需的飼料組份（如：高脂模型,，缺鐵性貧血模型等）。因此,，下面分普通飼料和特殊飼料兩部分來講,。
A 普通飼料
以常用的實驗動物為例，我們來討論一下它們飼料的組成,。
一是小鼠,、大鼠的飼料,。以玉米、大豆,、麩皮,、魚粉為主,，輔以復合維生素,、骨粉、微量元素,。一般做成長圓柱狀形,。或曰粗棒形,。直徑在1cm左右,。這樣的飼料又稱為顆粒飼料（本人覺得此名稱不妥，是否可稱為“條狀飼料‘,、“棒狀飼料”,？）。顏色一般為大豆黃色,。小鼠,、大鼠的飼料為全價飼料，即不需要再添加任何營養(yǎng)成分,。
二是豚鼠,、兔子的飼料。以苜蓿,、玉米,、大豆、麩皮,、魚粉為主,，輔以復合維生素、骨粉,、微量元素,。與小鼠、大鼠的飼料相比,，主要是苜蓿的比例達到了40%左右,。一般做成細長圓柱形?；蛟患毎粜?。直徑在0.3cm左右。顏色呈帶一點斑駁的青色,。豚鼠,、兔子的飼料成份基本一樣,，只是比例略有不同，一般可以共用,。因二者不能自身合成維生素C,，所以苜蓿粉的比例較大。但,，飼料是加水潤濕后,，經(jīng)高溫高壓而制成，維C及酶類等已部分破壞,。豚鼠,、兔子飼料不是全價飼料。因此,，在飼料之外,，仍要加少許青菜或青草，否則有的狀態(tài)不佳甚至死亡,。本人也曾用在飲水中加維C片的方法,，但效果似不如直接給予青菜。
三是狗的飼料,。以肉粉,、玉米、大豆,、麩皮,、魚粉為主，輔以復合維生素,、骨粉,、微量元素。有膨化飼料,。一般要增加肉類食物,。
四是猴的飼料。猴為雜食性,。喂以混合精飼料并輔以蘋果,、葫蘿卜?；旌暇暳辖M成：玉米粉60%,谷粉２０％,，面粉１５％，黃豆粉５％,，再加上骨粉,、魚粉、糖,、食鹽,、維生素等,。幼齡動物通常要加上奶粉。以前常以上述組分加水混合,，做成塊狀,，烘干，但現(xiàn)在有膨化顆粒飼料出售,。
對于小鼠,，每日的飼料在4~8g，大鼠在15~20g,；豚鼠在15~30g,。兔在30~80g/kg／天,。注意他們的嚙齒類動物行為,，就是喜歡咬東西。因為它們的牙齒終生生長,，于是它們要磨牙,。這樣，投予過多飼料它們也會浪費掉,。兔雖屬兔型目,，但有類似嚙齒目動物的行為。
下圖中所示是一些實驗動物飼料配方的百分比（％）,。
B 特殊飼料
這里主要是指一些用于造模的飼料,。
1. 高脂飼料
這可能是zui常用的一種造模飼料。主要原理是通過外源性膽固醇,、三酯的攝入形成高血脂,、動脈粥樣硬化動物模型。zui常用的動物是大鼠,、兔,、金黃地鼠。也有用其它動物的,，但通常以糊劑,、乳劑灌胃來造模。
下面我們來談談高脂飼料的配制,。
常用配方：豬油 10% 雞蛋黃 5% 膽固醇 1~2% 丙基硫氧嘧啶 0.2% 普通飼料 82.8~83.8% 另可酌加膽酸鹽 0.2% 左右,，維生素D3等。
原理：豬油富含三酯,；雞蛋黃是天然食物中含膽固醇zui高的,；丙基硫氧嘧啶有助于成模，因甲狀腺素促進膽固醇的分解,，而丙基抑制其作用,；膽酸鹽主要是促進膽固醇的吸收,；維生素D３主要是促進動脈粥樣硬化形成。
制法：膽固醇鱗片狀,，研細,；丙基研細；二者充分混合,。取雞蛋煮熟,，剝?nèi)〉包S，捏碎,，吹干,，研成細粉，與前二者混合好,。如要加膽酸鹽,、維生素D３，亦將其混合好,。然后以“等量遞增法”將上述藥料加入到普通飼料粉末中,。再將豬油化開，噴灑在飼料粉末之中混勻,?；旌弥髧娺m量水為黏合劑，加到制粒機中制成棒狀飼料,。
在此,，特別提出“等量倍增法”。因上述造模藥料與普通飼料的量相差懸殊,，直接加入其中是難以混勻的,。這樣會造成以后動物攝入的造模的膽固醇，三酯差異大,，不利于實驗,。所謂“等量遞增法”就是：將上述藥料入差不多相等的普通飼料粉末充分混勻；得混合物后,，再加與此混合物相等量的普通飼料混合,，充分混勻；如此類推,。比如：藥料為200g,，*次混合后即為400g，第二次混合后為800g…這樣就成倍地混合好,。因此,，又稱為“等量倍增法”。因為相等量的不同物質(zhì)混合時，相互混入對方的機率zui大,，zui容易混勻,。學過藥劑的朋友們是非常熟悉的，這在中藥的散劑中就是這樣做的,。沒學過這個方法的朋友要特別關(guān)注,。
目前有些飼料供應商稱可以提供現(xiàn)成的高脂飼料。一則他們很多根本就是胡亂地加入其中的,，極不均勻,，嚴重影響實驗。二則他們做的飼料中造模藥的比例不一定符合你的要求,。很少有人懂得“等量倍增法”的原理及實用價值,。因為目前飼料行業(yè)中專業(yè)人士多不會在一線，而是做管理工作,。做飼料的多是沒有專業(yè)知識,，而只是稍加培訓甚至沒有培訓的普通工人。當然,，“等量倍增”的做法很簡單,，關(guān)鍵是要有這樣的專業(yè)意識,。做此飼料時,，全程跟蹤，這樣才會對實驗結(jié)果心中有數(shù),。
在此,，我一而再，再而三地強調(diào)“等量倍增法”配制飼料,，就是為了站友們減少在此類實驗中的誤差,。因為，有人問我,，為什么他們的高脂組有些動物的血脂幾乎跟正常組沒有顯著差異,，而有的又高很多，標準差如此地大,？我*時間想到的就是飼料的配制是否有問題,。如果飼料沒配好，實驗可能前功盡棄,。 因此,，不厭其煩地說兩句：高脂飼料要親自配，且按要求,、按科學規(guī)律配（等量倍增法）,。 飼料成形后，要攤開置通風處吹干,，或以電風扇吹干,。不要受熱,。在春夏之季，尤應注意,。因其中含有脂肪油類,，且因制飼料時要經(jīng)過高溫壓制，放在一起易發(fā)熱,、生霉,。有人置冰箱保存，實不妥,。一則冰箱容量有限,；二則飼料中的水分未盡，出冰箱后,，冰化,，更易生霉，且動物不是太喜歡吃冷藏后的飼料,。一次配制飼料不宜過多,。一般可配實驗全程所需飼料的一半。后半段根據(jù)前面所消耗的實際量來酌性增減,。但需給足量,，寧多一點，不能少,。 高脂飼料比普通飼料要軟,，易碎。要注意輕拿輕放,。底部碎屑可收集起來,，再壓制成型。
2. 缺鐵性貧血飼料
3. 缺鋅飼料
第五,、實驗動物的飲水
下面我來介紹一下實驗動物飲用水的要求,，以及飲水器具。
A 飲用水
實驗動物級別的不同,，飲用的水也不同,。 通常情況下，普通級動物飲水達到生活飲用水標準即可,。 清潔級,、SPF要求滅菌?？筛邷馗邏簻缇?，也可以加次氯酸鈉，或以鹽酸調(diào)PH到2.5~3.0。后者又稱之為酸化水,。 無菌動物飲水只能高溫高壓滅菌,。
