羧基-瓊脂糖凝膠4B是用由環(huán)氧樹(shù)脂耦合方法將6-氨基已酸共價(jià)鍵偶聯(lián)到瓊脂糖4B上,。羧基-瓊脂糖凝膠4B含有一個(gè)10個(gè)碳原子連接臂自由羧基，耦合氨基基團(tuán)的配體,。長(zhǎng)長(zhǎng)的間隔臂使它特別適合固定的小分子,。
產(chǎn)品名稱：羧基-瓊脂糖凝膠4B （ECH Sepharose 4B）
基質(zhì)：4%瓊脂糖凝膠
耦合基團(tuán)：氨基
顆粒大小：90μm
大流速：75cm/h
操作溫度：室溫

羧基-瓊脂糖凝膠4B是用由環(huán)氧樹(shù)脂耦合方法將6-氨基已酸共價(jià)鍵偶聯(lián)到瓊脂糖4B上,。羧基-瓊脂糖凝膠4B含有一個(gè)10個(gè)碳原子連接臂自由羧基，耦合氨基基團(tuán)的配體,。長(zhǎng)長(zhǎng)的間隔臂使它特別適合固定的小分子,。

產(chǎn)品名稱：羧基-瓊脂糖凝膠4B (ECH Sepharose 4B)

基質(zhì)：4%瓊脂糖凝膠

耦合基團(tuán)：氨基

顆粒大?。?/strong>90μm

大流速：75cm/h

操作溫度：室溫

保存條件：貯存于4°C-8°C（保存溶液為20%乙醇）

使用方法

1.乙醇浸泡：在室溫下，將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時(shí),，并不斷攪拌以保證凝膠溶脹,，用無(wú)鹽水洗去殘存的乙醇濾干;

2.無(wú)鹽水浸泡：室溫下，在無(wú)鹽水中充分溶脹24小時(shí),，間隙攪拌,，以保證凝膠的*溶脹，然后,；

3.鹽酸浸泡：在常溫下再用0.2NHCl浸泡12小時(shí),，間隙攪拌，濾干,，水洗只中性,；

4.將溶脹好的凝膠脫氣后（真空抽濾或超聲波）根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi)，注意保持濕態(tài)裝柱,，并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層,；

5.上樣前平衡層析柱至少3-5個(gè)柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止（流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值）；

6.凝膠過(guò)濾的上樣量一般為5%的柱床體積,，我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積,，視分離情況可以調(diào)整；脫鹽時(shí)上樣量可以達(dá)到20%的柱床體積,，柱高的選擇也與分離要求相關(guān),，柱高控制在40-50cm以下，過(guò)高的凝膠層會(huì)引起較大的反壓,，應(yīng)當(dāng)盡可能避免,。難分離物質(zhì)要有定柱高和流速控制，脫鹽時(shí)高徑比為5：1即可,；

7.洗脫方法：可以用無(wú)鹽水,，也可以采用上柱時(shí)的緩沖液洗脫；在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化,；
8.在位清洗（CIP）凝膠使用十次后作一次CIP,，目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗四個(gè)柱體積,，再以至少三個(gè)柱體積平衡緩沖液再生,。