庫存現(xiàn)貨:SMMC-7721細胞,,人肝癌細胞株,,價格/說明書 全國各地均可發(fā)貨,全國統(tǒng)一價格
產品名稱:SMMC-7721細胞
中文名稱:人肝癌細胞
形態(tài)特性:上皮樣
生長特性:貼壁生長
培養(yǎng)基:DMEM 90%, Fetal Bovine Serum 10%
培養(yǎng)條件:37℃ 5% CO2
消化條件:0.25% (w/v) Trypsin-0.53 mM EDTA溶液,,消化5-10min
傳化比例:1:2-1:4
換液時間:2-3天換液一次
凍存液比例:85%培養(yǎng)基,,10%FBS, 5% (v/v) DMSO
凍存密度:1-3 ×10^6/管,液氮保存細胞純度:94%
細胞活力:90%(ViabilitybyTrypanBlueExclusion)
細胞檢測:細胞不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌
慧穎生物提供400多種細胞系細胞株,以及相應的細胞學實驗服務:血管新生、traswell,、劃痕實驗,、細胞遷移、克隆形成,、細胞凋亡,、細胞增殖、細胞周期等,。另有:示蹤細胞,、穩(wěn)定細胞株構建、細胞代感染、篩藥細胞株產品,、篩藥細胞株定制、pathway研究細胞,、STR分型鑒定,,細胞染色等技術服務提供。咨詢: ,!
SMMC-7721細胞,,人肝癌細胞株,價格/說明書 細胞傳代培養(yǎng)技術:
細胞復蘇
1. 將凍存的細胞取出后迅速放入37℃水浴中,,并不時搖動,,在一分鐘內使其*融化
2.將細胞吸出放入有培養(yǎng)基的離心管中中,用滴管輕輕吹打混勻,,800轉/min,,5分鐘離心;棄去上清液,,加入培養(yǎng)基,,混勻再離心一次,棄液,,加入4~5ml 培養(yǎng)基,,混勻,移入培養(yǎng)瓶中
細胞換液
1.用舊液體輕輕沖洗培養(yǎng)瓶底,,然后用滴管吸盡舊液(棄去)
2.加入PBS1~2ml,,輕輕搖晃,然后用滴管吸盡舊液(棄去)
3.如果細胞液比較臟,,可以重復步驟2
4.加入新培養(yǎng)基,,輕輕搖勻,放入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)
細胞傳代
1.用舊液體輕輕沖洗培養(yǎng)瓶底,,然后用滴管吸盡舊液(棄去)
2.加入PBS1~2ml,,輕輕搖晃,然后用滴管吸盡舊液(棄去)
3.加入約1~1.5ml胰酶,,室溫或培養(yǎng)箱中放置4~5分鐘,,直到所有貼壁細胞消化下來為止【判斷方法:倒置相差顯微鏡觀察,細胞變圓時就可以終止消化】
4.加入約1ml培養(yǎng)基(含有小牛血清)終止消化
5.用滴管吹洗一次,移入離心管, 800轉/min,,5分鐘離心
6.加入培養(yǎng)基,,吹打分散細胞,再根據(jù)分傳細胞瓶數(shù)補加一定量的含血清的培養(yǎng)基,,制成細胞懸液;分裝至2~3個培養(yǎng)瓶中
7.放入培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)
細胞計數(shù)
1.準備好顯微鏡,、載玻片,、蓋玻片,、血細胞計數(shù)板、吸管等儀器設備
2.按照“細胞傳代”中講述的方法制成細胞懸液
3.將細胞懸液取出若干,,滴入血細胞計數(shù)板,,注意不要有氣泡進入
4.加樣后靜置2~3min后觀察,數(shù)四角大格內的細胞總數(shù),。計數(shù)時應按照一定的路徑,,以免遺漏或重復。細胞壓線時計上不計下,,計左不計右,,計數(shù)2~3次,取平均值
5. 細胞密度 = 四大格中細胞總數(shù)÷4 ×104 = 細胞數(shù)/ml懸液
細胞凍存
1. 重復“細胞傳代”中的消化細胞的步驟,,將細胞消化下來,,轉移至離心管800轉/min,5分鐘離心,,棄液
2. 沉淀中加入凍存液,,輕吹制成懸液
3. 分轉到凍存管內,每個1~1.5ml
4. 將凍存管口封嚴
5.貼上標簽,,注明凍存時間,、細胞種類及代數(shù)
6. 按下列順序降溫,并zui終凍存:室溫→ 4℃ 20min → -20℃ 30min →-70℃凍存
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