MHCC97-H細(xì)胞*高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞 慧穎推薦熱賣細(xì)胞：

MHCC97-L細(xì)胞,，低轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞

MHCC97-H細(xì)胞*高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞

SK-HEP-1細(xì)胞，人肝腹水腺癌細(xì)胞

BEL-7404細(xì)胞,，人肝癌細(xì)胞

BEL-7402細(xì)胞,，人肝癌細(xì)胞

SMMC-7721人肝癌細(xì)胞

MHCC97-H細(xì)胞*高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞 介紹

細(xì)胞特性

1） 來(lái)源：肝癌

2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

3） 含量：>1x106 個(gè)/mL

4） 污染：支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌檢測(cè)為陰性

5） 規(guī)格：T75瓶或者1mL凍存管包裝

運(yùn)輸和保存：可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式：（1）干冰運(yùn)輸,，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇；（2）存活細(xì)胞,，收到后應(yīng)繼續(xù)生長(zhǎng),，傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，再進(jìn)行凍存,。具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟,。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基(DMEM/F-12，GIBCO,，貨號(hào)12400024,，添加NaHCO3 2.0g/L)，85%,；馬血清,，10%；胎牛血清,，5%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存,。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)隔夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)隔夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。

MHCC97-H細(xì)胞*高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞 慧穎細(xì)胞庫(kù)全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格,，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用,。

注意事項(xiàng)：

1. 收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們 ,！

2. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù),，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄,。

MHCC97-H細(xì)胞*高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞來(lái)源：來(lái)源于中山醫(yī)院，用人肝癌細(xì)胞株MHCC97-H接種裸鼠,，進(jìn)行3次肺轉(zhuǎn)移篩選,，取肺轉(zhuǎn)移瘤建成皮下接種后高度自發(fā)性肺轉(zhuǎn)移的肝癌細(xì)胞系。