U-2 OS細(xì)胞,，人骨肉瘤細(xì)胞形態(tài)

產(chǎn)品名稱：U-2 OS細(xì)胞

中文名稱：人骨肉瘤細(xì)胞

來源：人骨肉瘤

類別：類屬于正常細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)：上皮樣

生長狀態(tài)：貼壁生長

培養(yǎng)基：McCoy's 5a 90%, Fetal Bovine Serum 10%

培養(yǎng)條件：37℃,，5% CO2

消化條件：0.25% (w/v) Trypsin-0.03%(w/v) EDTA 溶液，消化 5-10min

主營細(xì)胞：HT-22細(xì)胞,，HUVEC細(xì)胞,，A549-luc-puro細(xì)胞，U87-MG細(xì)胞,，SNU-739細(xì)胞

消化比例：1：3-1：6

換液時間：2-3 天換液一次

凍存液比例：85%培養(yǎng)基,，10%FBS，5% (v/v) DMSO

凍存密度：1-3 ×10^6/管,，液氮保存

主營細(xì)胞：BEL-7404細(xì)胞,，HCT-116細(xì)胞，SK-OV-3細(xì)胞,，IOSE80細(xì)胞,，HL-7702細(xì)胞

若客戶收到2ml小管U-2 OS細(xì)胞,，人骨肉瘤細(xì)胞形態(tài)

收到細(xì)胞以后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超菌臺內(nèi),，嚴(yán)格無菌操作,；然后將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶，加入5ml左右含F(xiàn)BS的培養(yǎng)基混勻,，放入培養(yǎng)箱隔夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞匯合度：若未超過80%匯合度,，換液繼續(xù)培養(yǎng)，根據(jù)情況傳代或者凍存,。若超過80%匯合度,，可直接進(jìn)行傳代（細(xì)胞貼壁處理方法）。

1,、細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法,。從細(xì)胞資源中心獲得細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝,，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作,。

2,、鏡下觀察：將瓶裝的*培養(yǎng)液移入無菌瓶中，留待日后培養(yǎng)用,，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培養(yǎng)液,，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng),；超過80%匯合度時,，按要求比例消化傳代。（收到細(xì)胞,，建議棄去原基培養(yǎng),，使用新鮮*培養(yǎng)基培養(yǎng)）

3、消化方法：

1,、將瓶裝的*培養(yǎng)液移入無菌瓶中,，留待日后培養(yǎng)用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA (1X), Phenol Red消化,。（收到細(xì)胞,，建議棄去原基培養(yǎng)，使用新鮮*培養(yǎng)基培養(yǎng)）

2,、T25瓶加3ml PBS,，洗一次，棄上清,，再加1ml消化液消化,，顯微鏡下觀察,，等細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個后，加培養(yǎng)基混勻,，離心收集,，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6， 1:6-1:8）,，每T25瓶加培養(yǎng)基至6-8ml,，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng),。

慧穎生物購買U-2 OS細(xì)胞,，人骨肉瘤細(xì)胞形態(tài)注意事項(xiàng)：

1. 客戶在收到細(xì)胞時，請首先觀察培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否外滲,，培養(yǎng)液是否混濁。如發(fā)現(xiàn)有瓶破,、滲漏,、培養(yǎng)液混濁等問題，請在收到細(xì)胞后立即與我們,。
2. 由于運(yùn)輸過程中的問題,，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,，出現(xiàn)此狀態(tài)時,，請離心收集，重懸細(xì)胞,，置培養(yǎng)箱培養(yǎng),，細(xì)胞會重新貼附于瓶壁。如果細(xì)胞仍不能貼壁,，請用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,。
3. 收到細(xì)胞時如無異常情況，請按照細(xì)胞處理方法處理細(xì)胞,。