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紫外分光光度計(jì)法測(cè)多糖

閱讀:3783      發(fā)布時(shí)間:2016-7-11
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紫外分光光度計(jì)法測(cè)多糖

對(duì)照品溶液的制備取無水葡萄糖對(duì)照品適量,精密稱

定,,加水制成每lm l0. 25mg的溶液,,即得。

供試品溶液的制備精密稱取本品約lg,,置索氏提取器

中,,用85%乙醇提取至無色,取出,,殘?jiān)鼡]盡乙醇,,置100ml

量瓶中,加沸水使溶解,,冷卻至室溫,,加水至刻度,搖勻,,離心

10分鐘(轉(zhuǎn)速為每分鐘300轉(zhuǎn)),,取上清液,備用,。

總糖供試品溶液的制備精密量取供試品溶液5ml,,加

6mol/L鹽酸溶液5ml,置沸水浴中加熱30分鐘后,取出,,冷

卻,,加酚酞指示液1 滴,用6mol/L氫氧化鈉中和至微紅色,,

定量轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中,,并稀釋至刻度,搖勻,,離心,,取上清

液,備用,。

還原糖供試品溶液的制備精密量取供試品溶液5ml,,

25ml量瓶中,加水稀釋至刻度,,搖勻,,即得。

測(cè)定法精密量取對(duì)照品溶液,、總糖供試品溶液及還原

糖供試品溶液各2ml,,置25ml量瓶中,分別加入3,,5-二硝基

水楊酸溶液1.5ml,,搖勻,置沸水浴中加熱5 分鐘,,迅速用涼

水冷卻,,加水至刻度,搖勻,,以水2ml,,同法制成空白溶液。照

紫外-可見分光光度法(通則0401)測(cè)定,。在530nm波長(zhǎng)處分

別測(cè)定吸光度,,計(jì)算,即得,。

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