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聚乙二醇?xì)埩袅繙y(cè)定法

本法系依據(jù)聚乙二醇與鋇離子和碘離子形成復(fù)合物

( 1 : 1 ) ,用比色法測(cè)定聚乙二醇含量,。

測(cè)定法取供試品適量,，用水稀釋,，使蛋白質(zhì)濃度不

高于1%，即為供試品洛液,。精密量取供試品溶液1.0ml,，

加入0. 5mol/L高氯酸溶液5.0ml，混勻,，室溫放置1 5分

鐘,，以每分鐘4000轉(zhuǎn)離心1 0分鐘。取上清液4ml,，加人

氯化鋇溶液（稱取氯化鋇5g,，加水溶解至100ml) 1.0ml

和O.lmol/L碘溶液（稱取碘化鉀2.0g，加少量水溶解,，

然后加碘1.3g,，再加水至50ml，搖勻）0.5ml,，混勻,，室

溫反應(yīng)1 5分鐘,，照紫外-可見分光光度法（通則0401) ,，

在波長(zhǎng)53 5 n m處測(cè)定吸光度；同時(shí)以lml水代替供試品

溶液,，同法操作,，即為空白對(duì)照。

另精密稱取與供試品中聚乙二醇分子量相同的聚乙二

醇適量,，加水溶解,，并制成每lml含聚乙二醇lOOpg的溶

液，即為聚乙二醇對(duì)照品貯備液,。

取按下表制備的每lml含10?50Mg 的聚乙二醇對(duì)照

品溶液1_ 0ml,，加人0. 5mol/L髙氯酸溶液5.0ml,混勻，

自“室溫放置15分鐘”起,，同法操作,。

聚乙二醇含量/M g • m l - 1 10 20 30 40 50

聚乙二醇對(duì)照品貯備液/ml 0. 2 0. 4 0. 6 0. 8 1. 0

約1 % 蛋白質(zhì)溶液/ml 0. 2 0. 2 0. 2 0. 2 0, 2

水/ml 1. 6 1. 4 1.2 1.0 0. 8

以聚乙二醇對(duì)照品溶液的濃度h g / m l ) 對(duì)其相應(yīng)的

吸光度作直線回歸，將供試品溶液吸光度代人直線回歸方程,，計(jì)算出供試品溶液中聚乙二醇含量F (yg/ml),。

按下式計(jì)算： ‘

供試品聚乙二醇含量（g/L) - F X n X 1 0 ~ 3

式中F 為供試品溶液中聚乙二醇含量，pg/ml;

^ 為供試品稀釋倍數(shù),。

【附注】（1 ) 整個(gè)比色過程應(yīng)在試劑加人后的15?45

分鐘內(nèi)完成,，否則將要影響結(jié)果。

(2) 本法的靈敏度隨被測(cè)聚乙二醇的分子量的增加而

提高,。

(3) 1%的蛋白質(zhì)溶液系用不含聚乙二醇的蛋白質(zhì)溶

液配制,。