熒光分光光度計是一種常用的分析儀器,，用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜，產(chǎn)品具有性能穩(wěn)定,、使用靈活,、可靠性高、維護(hù)簡便等優(yōu)點,。用戶應(yīng)該怎樣使用熒光分光光度計產(chǎn)品呢?下面小編就來具體介紹一下熒光分光光度計的操作方法,，希望可以幫助到大家。
(一)樣品準(zhǔn)備
1.液體樣品根據(jù)用戶提供的技術(shù)指標(biāo),，檢查濃度范圍是否合適,，如果需要稀釋，則要考慮所需溶劑類型和稀釋倍數(shù),。
2.固體樣品均勻粉末,、片狀或具有光滑平面的塊狀樣品，均可直接測定,。
(二)操作步驟
1.開機：接通電源,，打開主機開關(guān)，點燃(打開)光源后,，根據(jù)說明書要求啟動計算機,。
2.檢測前準(zhǔn)備：參照儀器說明書，在20天內(nèi)至少進(jìn)行一次激發(fā)校準(zhǔn)和發(fā)射校準(zhǔn),，檢測前儀器應(yīng)預(yù)熱。
3.工作條件的選擇：環(huán)境溫度應(yīng)在20℃±5℃;相對濕度不大于70%;電源穩(wěn)定,，無磁場,、電場干擾。根據(jù)樣品的特性及熒光強度,，選擇合適的儀器工作條件(如狹縫,、PM增益、響應(yīng)時間等)。
4.基本測定
(1)熒光激發(fā)光譜測定
設(shè)置儀器參數(shù),，掃描發(fā)射波長,，找到maxλem，以此為發(fā)射波長,，記錄發(fā)射強度作為激發(fā)波長的函數(shù),，便得到激發(fā)光譜。
(2)熒光發(fā)射光譜測定
設(shè)置儀器參數(shù),，掃描激發(fā)波長,，找到maxλex，以此為激發(fā)波長,，記錄發(fā)射強度與發(fā)射波長間的函數(shù)關(guān)系,，便得到熒光發(fā)射光譜。
(3)差譜測定
設(shè)置儀器參數(shù),，選擇合適的工作方式,，測定背景溶液的發(fā)射光譜并儲存起來，在一定的工作方式下,，掃描樣品溶液的發(fā)射波長,，得到當(dāng)時的光度值和儲存的背景值之間的差示值，即差譜,。
(4)峰面積積分
選擇適當(dāng)?shù)墓ぷ鞣绞?，對樣品溶液進(jìn)行積分操作，即得到峰面積積分,。
(5)熒光強度
選擇合適的測量參數(shù),，設(shè)置λex、λem,，采用定點讀數(shù)或掃描方式,，即可測得所選波長處的熒光強度。
(6)定量測定
配制一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,，在一定的測定條件下,，設(shè)置λex、λem,，按照由稀至濃的次序,，測定標(biāo)準(zhǔn)溶液的熒光強度，繪制熒光強度—濃度的工作曲線,，不改變儀器參數(shù)測定未知溶液的熒光強度,，由工作曲線即可求出未知溶液的濃度。
(三)分析結(jié)果的表述
1.熒光激發(fā)光譜,、發(fā)射光譜以及其他光譜由儀器控制電腦直接繪出,。
2.峰面積積分,、熒光強度由儀器控制電腦計算顯示。
3.定量測試：在相同的測定條件下,，測定一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液的熒光強度,，繪制出熒光強度-濃度的工作曲線。濃度未知的溶液的熒光強度測定后,，由工作曲線求出該溶液的濃度,。
熒光分光光度計使用注意事項
1.在實驗開始前，應(yīng)提前打開儀器預(yù)熱,，并配制好所需的溶液,，對于已經(jīng)配制好的溶液，在不用時放在4℃冰箱中保存,，放置時間超過一星期的溶液要重新配制,。
2.實驗所用的樣品池是四面透光的石英池，拿取的時候用手指掐住池體的上角部,，不能接觸到四個面,，清洗樣品池后應(yīng)用擦鏡紙對其四個面進(jìn)行輕輕擦拭。
3.在測試樣品時,，注意熒光強度范圍的設(shè)定不要太高,，以免測得的熒光強度超過儀器的測定上限。
4.實驗結(jié)束后,，要及時的清理臺面,，處理廢液，清洗和放置好
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