貨號：YC2306                                                 規(guī)格：50管/48樣

總抗氧化能力（Total antioxidant capacity ,，T-AOC）

試劑盒說明書

可見分光光度法

注意：正式測定之前選擇 2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義

測定對象中各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶等構成總抗氧化水平,。在生物學、醫(yī)學和藥學研究中常常檢測血漿,、血清,、唾液、尿液等各種體液,，細胞或組織等裂解液,、植物或中草藥抽提液

及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。

測定原理

在酸性環(huán)境下,，物質(zhì)還原Fe³⁺-三吡啶三吖嗪(Fe³⁺-TPTZ)產(chǎn)生藍色的Fe²⁺-TPTZ的能力反映了其總抗氧化能力,。

自備實驗用品

可見分光光度計、恒溫水浴鍋,、低溫離心機,、1mL 玻璃比色皿和蒸餾水。

試劑組成和配制

提取液：液體 60mL×1 瓶,，使用前預冷,。

試劑一：液體 50mL×1 瓶，避光保存,。

試劑二：液體 5mL×1 瓶,，4℃避光保存。

試劑三：液體 5mL×1 瓶,，避光保存,。

樣品的制備

(1) 血清、血漿,、唾液或尿液樣品

血漿（制備時可以使用肝素或檸檬酸鈉抗凝,，不宜使用 EDTA 抗凝）4℃，5000rpm 離心10min,，取上清待測,。血清,、唾液或尿液樣品直接用于測定，也可以-80℃凍存（不宜超30 d）后再測定,。

(2) 組織樣品

按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織,，加入 1mL提取液）進行冰浴勻漿，然后 10000g,，4℃離心 10min,，取上清，置冰上待測,。

(3) 細胞樣品

按照細胞數(shù)量（10⁴個）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細胞加入1mL 提取液）,，冰浴超聲波破碎（功率 200W，超聲 3s,，間隔 10s,，重復 30 次）；10000g,，4℃離心 10min,，取上清，置冰上待測,。

操作步驟

混合液(現(xiàn)配現(xiàn)用)：將試劑一,、試劑二、試劑三按 10:1:1 的比例混合,，使用前預溫至 37℃ ,。

注意：空白管只需測定一次,。

總抗氧化能力計算

1. 定義：樣品的抗氧化能力以達到同樣吸光度變化值（△A）所需的標準液離子濃度表示。

標準曲線為 y=0.6308 x +0.1291,，R²=0.9989

2. 計算公式：

(1)按蛋白濃度計算

總抗氧化能力（U/mg prot）=1÷0.6308×（△ A-0.1291）× V 反總÷（V 樣× Cpr）

=53.9×（△ A-0.1291）÷ Cpr

(2)按樣品質(zhì)量計算

總抗氧化能力（U/g）=1÷0.6308×（△ A-0.1291）× V 反總÷（V 樣÷V 樣總×W）

=53.9×（△ A-0.1291）÷ W

(3)按細胞數(shù)量計算

總抗氧化能力（U/10⁴ cell）=1÷0.6308×（△A-0.1291）×V 反總÷V 樣×V 樣總÷細胞數(shù)量（萬個）= 53.9×（△A-0.1291）÷ 細胞數(shù)量（萬個）

(4)按液體體積計算

總抗氧化能力（U/mL）=1÷0.6308×（△A-0.1291）× V 反總÷V 樣

=53.9×（△A-0.1291）÷ Cpr

V 樣總：加入提取液體積,，1 mL； V 反總：反應總體積,，1.02mL,；V 樣：反應中樣品體積，

0.03mL,；W：樣品質(zhì)量,，g；Cpr：樣本蛋白濃度,，mg/mL

注意事項

1. 試劑二對人體有刺激性,，請采取適當?shù)姆雷o措施,。為了您的安全和健康，請穿實驗服并

戴乳膠手套操作,。

2. 盡量避免使用在酸性條件下呈藍色或接近藍色的試劑,，否則對本試劑盒的檢測結(jié)果產(chǎn)生

干擾。

3. 樣品中不宜添加 Tween,、Triton 和 NP-40 等去垢劑和 DTT,、巰基乙醇等影響氧化還原反

應的還原劑。

4. 如果樣品測定出來的吸光值在標準曲線范圍以外,，需把樣品適當稀釋或濃縮后再進行測

定,。

5. 試劑盒 2-8℃保存。

糖原含量說明書

ca ++ mg ++ - atp 酶活性測定說明書