國(guó)產(chǎn)猴免疫球蛋白G2（IgG2）elisa試劑盒代測(cè)

l 本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿,、組織,、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中猴免疫球蛋白G2（IgG2）的含量。

l 有效期：6個(gè)月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用,，不用于臨床診斷

實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）,。往預(yù)先包被猴免疫球蛋白G2（IgG2）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的猴免疫球蛋白G2（IgG2）呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度,。

ELISA試劑盒組成

酶標(biāo)板,、酶標(biāo)記物、樣品稀釋液,、濃縮洗滌液,、底物液A、底物液B,、陽(yáng)性對(duì)照,、陰性對(duì)照

國(guó)產(chǎn)猴免疫球蛋白G2（IgG2）elisa試劑盒代測(cè)操作步驟

（一）樣品準(zhǔn)備

1.取動(dòng)物全血按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮,，無(wú)溶血,、無(wú)污染。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存，長(zhǎng)期需置-20℃保存,。

2.用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋（如2μl血清加入198μl樣品稀釋液中,，混勻）。陰,、陽(yáng)性對(duì)照不用稀釋,。

3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋,。

（二）檢驗(yàn)方法

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,，恢復(fù)至室溫。

2.取所需用量酶標(biāo)板條,，設(shè)空白對(duì)照1孔,、陰性/陽(yáng)性對(duì)照各2孔，未用的板條盡快密封,，2～8℃保存,。

3.空白對(duì)照孔加樣品稀釋液100μl；陰,、陽(yáng)性對(duì)照孔分別加入陰,、陽(yáng)性對(duì)照100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl,。

4.混勻,，置37℃反應(yīng)30分鐘。

5.扣去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次,，拍干,。

6.每孔加酶標(biāo)記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應(yīng)30分鐘,。

7.洗滌,，同步驟5。

8.每孔依次加底物液A,、底物液B各50μl,，混勻，37℃避光反應(yīng)10分鐘,。

9.每孔加終止液50μl,，混勻，用空白孔調(diào)零,，于450nm(可用630nm作參比波長(zhǎng)）測(cè)定各孔吸光值（A值）,。

ELISA注意事項(xiàng)

1. 當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩,，避免起泡。

2. 洗滌過(guò)程非常重要,，不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性,。

3. 一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣。

4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,，做復(fù)孔,。

5. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高，請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù),。

6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液工作液時(shí),，請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制,，不能混淆。

7. 底物請(qǐng)避光保存,。

8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑,。

問(wèn)題解答

Elisa試劑盒陰性對(duì)照及陽(yáng)性對(duì)照解析

Elisa試劑盒陰性對(duì)照及陽(yáng)性對(duì)照：陰、陽(yáng)性對(duì)照若有正確的結(jié)果,，對(duì)試劑盒操作的結(jié)果可以有粗略的判斷,。

空白對(duì)照：對(duì)ELISA試劑來(lái)說(shuō)，空白對(duì)照實(shí)際上是不加標(biāo)本不加酶做對(duì)照,?？瞻讓?duì)照主要測(cè)系統(tǒng)的吸光率?？瞻讓?duì)照在單波長(zhǎng)測(cè)量時(shí)顯得尤其重要

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