elisa試劑盒注意事項

1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果,。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃,。使用后立即冷藏保存試劑。

2. 洗板不正確可以導致不準確的結果,。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體,。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

3. 消除板底殘留的液體和手指印,，否則影響OD值,。

4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經變藍的底物液不能使用,。

5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果,。

6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。

7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上,。

8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體,。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。

9. 不能使用過期產品,。

10. 如果可能傳播疾病,，所有的樣品都應管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置,。

試劑準備

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用,。

20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水,。

elisa試劑盒操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設置標準品孔和樣本孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,；

3.  樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加,。

4. 除空白孔外,，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。

5.  棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）,。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,，37℃避光孵育15min,。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內,，在450nm波長處測定各孔的OD值。

實驗結果計算

以所測標準品的OD值為橫坐標,，標準品的濃度值為縱坐標,，在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線，并得到直線回歸方程,，將樣品的OD值代入方程,，計算出樣品的濃度。