詳細介紹
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿,、組織、細胞上清及相關液體樣本中猴抗線粒體抗體(AMA)的含量,。
l 有效期:6個月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,,不用于臨床診斷
實驗原理
試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被猴抗線粒體抗體(AMA)捕獲抗原的包被微孔中,,依次加入標本,、標準品、HRP標記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的猴抗線粒體抗體(AMA)呈正相關,。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度,。
AMA,國產(chǎn)猴抗線粒體抗體elisa試劑盒哪家好具體操作方法
以雙抗體夾心法為例展示:
1,、雙抗體夾心法檢測抗原
操作步驟如下:
1)將特異性抗體與固相載體結合,形成固相抗體,。洗滌除去尚未結
合的抗體及一些雜質(zhì),。
2)加入待測標本,保溫反應,。標本中的抗原與固相抗體結合,,形成固相抗原抗體復合物。洗滌除去其他未結合物質(zhì),。
3)加酶標抗體,,保溫反應。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合,。*洗滌未結合的酶標抗體,。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關。
4)加底物顯色,。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物,。通過比色,測知標本中抗原的量,。在臨床檢驗中,,此法適用于檢驗各種蛋白質(zhì)等大分子抗原,例如 HBeAg,、HBsAg,、hCG 、AFP等,。只要獲得針對受檢抗原的特異性抗體,,就可用于包被固相載體和制備酶結合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清,,包被和酶標所使用的抗體分別取自不同種屬的動物,。如應用單克隆抗體,一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗,,分別用于包被固相載體和制備酶結合物,。這種雙位點夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標本和酶標抗體一起保溫反應,,作一步檢測,。
在一步法測定中,,當標本中受檢抗原的含量很高時,過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結合,,而不再形成"夾心復合物",。類同于沉淀反應中抗原過剩的后帶現(xiàn)象,此時反應后顯色的吸光值(位于抗原過剩帶上)與標準曲線(位于抗體過剩帶上)某一抗原濃度的吸光值相同,,如按常法測讀,,所得結果將低于實際的含量,這種現(xiàn)象被為鉤狀效應(hook effect),,因為標準曲線到達高峰后呈鉤狀彎落,。鉤狀效應嚴重時,反應甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結果,。因此在使用一步法試劑測定標本中含量可異常增高的物質(zhì)(例如血清中 HBsAg,、AFP 和尿液 hCG 等)時,應注意可測范圍的zui高值,。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應,。
客戶收集樣品要求
·客戶需提供待檢測抗體和包被用抗原。
·檢測的樣本為細胞培養(yǎng)上清,、人和動物的血清,、血漿,。
·樣本收集后應立即-20℃保存,,若長期保存應-70℃。
·樣本量的要求:若一個指標做復孔檢測應不少于250ul,,做單孔檢測應不少于120ul,。建議若客戶樣本量充足提供500ul以上。
·客戶的樣本收集后,,立即按要求保存,,切忌反復凍融。外地客戶郵寄需要用干冰運輸,。郵寄前請與溝通確認,。
溫馨提示:試劑盒內(nèi)酶標條可拆卸,按實驗需求可分多次使用;使用后的剩余試劑盒建議在*實驗后1個月內(nèi)使用完畢,。產(chǎn)品過期時間以盒子上的標簽為準,,保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。
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發(fā)票問題
1,、本公司一律開具正規(guī)發(fā)票,上海市國家稅務局通用機打發(fā)票,。
2,、需要發(fā)票的客戶,請?zhí)峁╅_票信息,。
*辨別優(yōu)劣的檢測方法告訴您:
1. 選定一個檢測范圍內(nèi)的濃度做多孔重復,,可看出平行性好不好。即板內(nèi)CV值的大小,,此操作時需要小心加樣的準確性,。對一些制作較粗糙的試劑盒來說,板間CV值是較大的,。
2. 可采用已知濃度的重組細胞因子,,稀釋到檢測范圍內(nèi)作為樣本加入,看檢測的準確性,。
3. 對用待測指標的重組細胞因子做試劑盒說明書上標定的zui小濃度稀釋,,可測出靈敏度,建議5個復孔以上才有意義,。一般廠家以20個復孔做出的結果作為檢測限,。用此實驗可驗證出所購試劑盒的靈敏度是否如說明書所述,也可判斷出所購試劑盒是否有夸大之說,。
4. 如果有相同指標的進口試劑盒,,可用對方的標準品作為樣本,分別加入各自的試劑盒做檢測,,以檢測試劑盒的真實性,,準確性。如其中一種是的,,比較可靠的話,,可作為標準來驗證另一試劑盒的準確程度。