產(chǎn)品名稱：肉毒梭菌A/B型毒素基因PCR檢測試劑盒
英文名稱：PCR Detection Kit for Botulinum Neurotoxin Genes Type A/B

產(chǎn)品編號(hào)與包裝規(guī)格：

產(chǎn)品簡介：本試劑盒基于PCR技術(shù)，并適用于食品中肉毒梭菌A/B型毒素基因的檢測,。

肉毒梭菌A/B型毒素基因PCR檢測試劑盒檢測原理：利用2對特異性引物和PCR反應(yīng)所需其他試劑,，如反應(yīng)緩沖液、dNTPs以及Taq DNA聚合酶等,，加入待檢DNA模板樣品,，即可進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。經(jīng)比對擴(kuò)增產(chǎn)物目標(biāo)條帶即可判定A/B型肉毒梭菌毒素基因,。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
      1. 快速簡便：將酶,、引物等反應(yīng)組分混勻后進(jìn)行干粉化處理,，增加試劑穩(wěn)定性，使用時(shí)減少溶液配制步驟,，更為便捷,，整個(gè)檢測反應(yīng)可在3 h內(nèi)完成；
      2. 特異性高：按照GB 4789.12?2016《食品微生物學(xué)檢驗(yàn)肉毒梭菌及肉毒毒素檢驗(yàn)》提供的目標(biāo)基因引物,，保證擴(kuò)增反應(yīng)的高度特異性；
      3. 判讀簡單：擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳和紫外儀觀察目標(biāo)條帶即可判別,，直觀方便,。

儲(chǔ)存條件與保質(zhì)期：2~8℃條件下儲(chǔ)存，有效期為12個(gè)月,。

所需其他材料和適用儀器：
      1. PCR儀器,、高速離心機(jī)、電泳儀,、水平電泳槽,、紫外儀、移液器,、移液槍頭及離心管等,；
      2. 瓊脂糖、溴化乙錠（EB）或其他核酸染料,。

肉毒梭菌A/B型毒素基因PCR檢測試劑盒產(chǎn)品組分：

肉毒梭菌A/B型毒素基因PCR檢測試劑盒使用指南：

1,，樣品前處理

   1) 參照GB 4789.12?2016，挑取可疑菌落或待鑒定菌株接種TPGY,，35℃±1℃厭氧培養(yǎng)24h,。吸取TPGY培養(yǎng)液1mL至無菌離心管中，12000 r/min離心2 min,，棄上清,，加入30 μL裂解液，充分懸浮,，轉(zhuǎn)移至0.2 mL無菌離心管中,，輕彈管壁消除氣泡，99℃加熱10 min,；

   2) 12000 r/min離心15 min,，上清即為粗提的DNA，可轉(zhuǎn)移至0.2 mL無菌離心管中,，在-20℃下可長期保存,。

2，加樣,、反應(yīng)

   1) 首-次使用時(shí),，分別加入80 μL超純水至陽性對照和陰性對照管中,，充分溶解，-20℃存儲(chǔ)待用,；
   2) 取出干粉試劑,，按照需求分別剪取n個(gè)檢測試劑管（n=待檢測樣品數(shù)+1管陽性對照+1管陰性對照），每管加入18 μL復(fù)溶液,，充分溶解后待用,；
   3) 向上述已加入復(fù)溶液的n個(gè)反應(yīng)管中分別加入待測樣品核酸、陰性對照,、陽性對照各2 μL,，緊蓋后置于PCR儀中按設(shè)定的反應(yīng)程序進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)；
   4) PCR 反應(yīng)程序如下：

3,，結(jié)果判讀：反應(yīng)后每管中加入4 μL6×Loading buffer,，混勻，并取8 μL經(jīng)1.5%瓊脂糖凝膠電泳,，在紫外儀下觀察,，陰性對照無條帶擴(kuò)增，陽性對照中出現(xiàn)目標(biāo)條帶（參照圖1）,，PCR試驗(yàn)結(jié)果成立,。根據(jù)每個(gè)樣品對應(yīng)的反應(yīng)產(chǎn)生的目標(biāo)條帶，即可判斷肉毒梭菌毒素基因類型,。若陰陽性對照管反應(yīng)結(jié)果不符,，則本次檢測結(jié)果無效，應(yīng)重新檢測或與產(chǎn)品技術(shù)支持聯(lián)系,。

肉毒梭菌A/B型毒素基因PCR檢測試劑盒用于食品中肉毒梭菌A/B型毒素基因的檢測,。

肉毒梭菌A/B型毒素基因PCR檢測試劑盒用于食品中肉毒梭菌A/B型毒素基因的檢測。