細菌藍白斑篩選原理：IPTG為安慰型誘導物,，可誘導β-半乳糖苷酶的產(chǎn)生,，X-gal是β-半乳糖苷酶的作用底物，在β-半乳糖苷酶的作用下X-gal被切割成半乳糖和深藍色的物質(zhì)：5-溴-4-靛藍,，有色物質(zhì)可使所在的菌落呈現(xiàn)藍色,。但當含有l(wèi)ac啟動子的質(zhì)粒中插入了外源基因，則不能產(chǎn)生β-半乳糖苷酶,，因此不能分解X-gal產(chǎn)生藍色底物,，所在的菌落呈現(xiàn)白色（相對藍色），這樣的菌落才有可能是我們想要的菌株,。藍白斑篩選減輕了在篩選陽性克隆菌落時的工作量,。
使用濃度：IPTG濃度：50mg/ml；X-gal濃度：20mg/ml
直接涂板法：取IPTG溶液10l,，X-gal溶液20l滴在培養(yǎng)基上,，同時滴加50～100l無菌水或無菌LB，用涂布棒涂抹均勻,，放表面無水后即可使用,。
預制板：倒板時，在溫度降50℃后,。每100mlLB中加入250l的IPTG溶液和500?l的X-gal溶液,，混勻后制板即可。
注意：
1,、X-gal不溶于水,，用二甲基甲酰胺(DMF)溶解；
2,、X-gal對光敏感,，含有X-gal的平板應該避光保存，在1～2周內(nèi)使用,；
3,、培養(yǎng)后藍白斑顯示不明顯可將平板放入4℃冰箱中，一段時間后藍白斑顯示會比較明顯,，便于挑選,。
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