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葡萄糖氧化酶（GOD）測試盒
微量法
貨號：BC0695
規(guī)格：100T/96S

產(chǎn)品內容：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存,；
試劑一：液體 15mL×1 瓶,，4℃保存；
試劑二：液體 3mL×1 瓶,，4℃保存,；
試劑三：液體 1mL×1 支，-20℃保存,，融化后可分裝保存,。

產(chǎn)品說明：
    GOD（EC 1.1.3.4）廣泛存在于動物和植物中，催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,，并產(chǎn)生 H 2 O 2 ,，是生物體中產(chǎn)生活性氧的代謝途徑之一。
    GOD 催化葡萄糖產(chǎn)生 H 2 O 2 ,，過氧化物酶在有氧存在時催化 H 2 O 2 分解產(chǎn)生的氧又將鄰聯(lián)茴香胺氧化生成有色物質,，顏色深淺與葡萄糖氧化酶活性成線性關系。

需自備設備跟儀器
    可見分光光度計/酶標儀,、水浴鍋,、臺式離心機、可調式移液器,、微量比色皿/96 孔板,、研缽、冰和蒸餾水

操作步驟
一,、 樣品測定的準備
1,、組織處理：稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液進行冰浴勻漿,；8000g 4℃離心 10min,，取上清，置冰上待測,。
2,、血清（漿）：直接檢測。
二,、 測定步驟
1,、分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上,，調節(jié)波長 500nm，蒸餾水調零,。
2,、GOD 工作液的配制：取 15mL 試劑一加 3mL 試劑二混勻，調 PH  5.1（現(xiàn)配現(xiàn)用）,。
3,、加樣表：
試劑名稱（μL）  測定管
GOD 工作液  174
試劑三  6
混勻，37℃（哺乳動物）或 25℃（其它物種）水浴 5min
樣本  20
樣品測定前將 GOD 工作液與試劑三放入 37℃水浴中保溫,，然后將上述試劑按順序加入微量比
色皿/96 孔板中,，加樣本的同時開始計時；在 500 nm 波長下記錄 20 秒時的初始吸光度 A1 及 1 分20 秒時的吸光度 A2,。計算 ΔA=A2-A1,。
三、GOD  活力單位的計算
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1,、動物組織 GOD 活力的計算
（1）按蛋白濃度計算
單位的定義 ：每 mg 組織蛋白在反應體系中每分鐘催化產(chǎn)生 1μmol 氧化型鄰聯(lián)茴香胺定義為一個酶活力單位。
GOD（U/mg prot）=ΔA÷(ε×d)×V 反總÷(Cpr×V 樣)÷T=1333×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
單位的定義：每 g 組織在反應體系中每分鐘催化產(chǎn)生 1μmol 氧化型鄰聯(lián)茴香胺定義為一個酶活力單位,。
GOD（U/g 鮮重）=ΔA÷(ε×d)×V 反總÷(W÷V 提取×V 樣)÷T=1333×ΔA÷W
2,、血清（漿）GOD 活力的計算
單位的定義 ：每 mL 血清（漿）在反應體系中每分鐘催化產(chǎn)生 1μmol 氧化型鄰聯(lián)茴香胺定義為一個酶活力單位。
GOD（U/mL）=ΔA÷d÷ε×V 反總÷T÷V 樣本=1333×ΔA
V 反總：反應總體積,，0.2mL,；V 樣本：加入樣本體積，0.02mL,；V 提取,，加入提取液體積，
1mL,；cpr：樣本蛋白濃度,，mg/mL；W：樣本鮮重,，g,；d：光徑，1cm,；ε：氧化型鄰聯(lián)茴香胺消光系數(shù),，7.5×10 -3 mL/μmol/cm；T：反應時間,，1min,。
b.用 用 96  孔板測定的計算公式如下
1、動物組織 GOD 活力的計算
（1）按蛋白濃度計算
單位的定義 ：每 mg 組織蛋白在反應體系中每分鐘催化產(chǎn)生 1μmol 氧化型鄰聯(lián)茴香胺定義為一個酶活力單位,。
GOD（U/mg prot）=ΔA÷(ε×d)×V 反總÷(Cpr×V 樣)÷T=2222×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
單位的定義：每 g 組織在反應體系中每分鐘催化產(chǎn)生 1μmol 氧化型鄰聯(lián)茴香胺定義為一個酶活力單位,。
GOD（U/g 鮮重）=ΔA÷(ε×d)×V 反總÷(W÷V 提取×V 樣)÷T=2222×ΔA÷W
2,、血清（漿）GOD 活力的計算
單位的定義 ：每 mL 血清（漿）在反應體系中每分鐘催化產(chǎn)生 1μmol 氧化型鄰聯(lián)茴香胺定義為一個酶活力單位。
GOD（U/mL）=ΔA÷d÷ε×V 反總÷T÷V 樣本=2222×ΔA
V 反總：反應總體積,，0.2mL,；V 樣本：加入樣本體積，0.02mL,；cpr：樣本蛋白濃度,，mg/mL；
W：樣本鮮重,，g,；d：光徑，0.6cm,；ε：氧化型鄰聯(lián)茴香胺消光系數(shù),，7.5×10 -3 mL/μmol/cm；T：反應時間,，1min,。
1、不同勻漿組織中 GOD 活力不一樣,，做正式試驗之前請做 1-2 只預試,，若 A2-A1>1,
則說明組織活力太高，必須用提取液稀釋成適當濃度勻漿上清液,，使 A2-A1<1,，
以提高檢測靈敏度。
實驗過程中若出現(xiàn) A1> A2 現(xiàn)象請將樣本用提取液稀釋成適當濃度.
2,、好兩個人同時做此實驗,，一個人比色，一個人計時,，以保證實驗結果的準確性,。
3、此試劑盒僅適用于動物組織和動物血清（漿）,。

葡萄糖氧化酶（GOD）測試盒 微量法 葡萄糖氧化酶（GOD）測試盒 微量法