elisa試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知濃度的標準品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測,。先將生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,,加入親和素標記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,,然后加入底物A,、B,和酶結(jié)合物同時作用,。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關系。
ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記,。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,,又保留酶的活性。在測定時,,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應,。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,,也通過反應而結(jié)合在固相載體上,。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析,。由于酶的催化效率很高,,間接地放大了免疫反應的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度,。 ELISA可用于測定抗原,,也可用于測定抗體。
然而,,影響Elisa試驗結(jié)果的因素很多,,故加強各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學的優(yōu)點。
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