檢測范圍： 96T
0.3pg/ml-12pg/ml
使用目的：
本試劑盒用于測定雞血清,、血漿及相關液體樣本中沙門氏菌（Salmonella）含量,。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中雞沙門氏菌（Salmonella）水平,。用純化的雞沙門氏菌（Salmonella）抗體包被微孔板，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入沙門氏菌（Salmonella）,，再與HRP 標記的沙門氏菌（Salmonella）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,，經過*洗滌后加底物TMB 顯色,。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的沙門氏菌（Salmonella）呈正相關,。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線計算樣品中雞沙門氏（Salmonella）濃度,。
試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標試劑 6ml×1 瓶 8 標準品（20pg/ml） 0.5ml×1 瓶
3 酶標包被板 12 孔×8 條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張
6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個
標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行,，提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存,，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3 的樣品,，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。
10pg/ml 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液
5pg/ml 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
2.5pg/ml 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
1.25pg/ml 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
0.625pg/ml 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）,、標準孔,、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘,。
4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30 秒后棄去，如此重復5 次,，拍干,。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl,，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3,。
8. 洗滌：操作同5,。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）,。
11. 測定：以空白空調零,，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。測定應在加終止液后15 分鐘以內進行,。
提供商 |
北京索萊寶科技有限公司 |
下載次數 |
223次 |
資料大小 |
14KB |
資料類型 |
EXCEL 文檔
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資料圖片 |
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