熒光染料CFSE的定義
5- or 6-(N-Succinimidyloxycarbonyl)fluorescein 3',6'-diacetate
5(6)-羧基二乙酸熒光素琥珀酰亞胺酯
熒光染料CFSE(CFDA-SE),,是一種可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的新型染料,可以標(biāo)記活體細(xì)胞,。其基本原理如下:CFSE能夠輕易穿透細(xì)胞膜,,在活細(xì)胞內(nèi)與胞內(nèi)蛋白共價(jià)結(jié)合,水解后釋放出綠色熒光,。
在細(xì)胞分裂增殖過(guò)程中,,它的熒光強(qiáng)度會(huì)隨著細(xì)胞的分裂而逐級(jí)遞減,標(biāo)記熒光可平均分配兩個(gè)子代細(xì)胞中,,因此其熒光強(qiáng)度是親代細(xì)胞的一半,,根據(jù)這一特性,它可被用于檢測(cè)細(xì)胞增殖,,細(xì)胞周期的估算及細(xì)胞分裂等方面,。另外,CFSE標(biāo)記的細(xì)胞用于體內(nèi)觀察可以長(zhǎng)達(dá)數(shù)周之久,,它常被用來(lái)做活體細(xì)胞檢測(cè)實(shí)驗(yàn)和用熒光電鏡觀察細(xì)胞長(zhǎng)期活動(dòng)的實(shí)驗(yàn),。熒光探針CFSE進(jìn)入細(xì)胞后定位于細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核,,在細(xì)胞核的熒光染色強(qiáng),,并證實(shí)CFSE不影響細(xì)胞的增殖能力。此方法操作簡(jiǎn)單,,且不用放射性同位素,,不存在安全隱患,。可以更快速,,更準(zhǔn)確和更安全的得到想要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
CFSE(CFDA-SE)是一種可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞染色試劑,,CFSE 進(jìn)入細(xì)胞后可以不可逆地與細(xì)胞內(nèi)的氨基結(jié)合偶聯(lián)到細(xì)胞蛋白質(zhì)上,。在細(xì)胞分裂增殖過(guò)程中,CFSE 標(biāo)記熒光可平均分配兩個(gè)子代細(xì)胞中,因此其熒光強(qiáng)度是親代細(xì)胞的一半,,用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡在490 nm 激發(fā)光處可對(duì)其進(jìn)行分析,。熒光探針CFSE進(jìn)入細(xì)胞后定位于細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核,,在細(xì)胞核的熒光染色強(qiáng),,并證實(shí)CFSE不影響細(xì)胞的增殖能力。
熒光染料CFSE 是一種很有價(jià)值的細(xì)胞標(biāo)記示蹤劑,,不僅用于細(xì)胞增殖的體外實(shí)驗(yàn),也可用于追蹤細(xì)胞在體內(nèi)的分裂增殖過(guò)程,。
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