| 48T/96T小鼠游離甲狀腺素（FT4）ELISA試劑盒的詳細資料： |
| 小鼠游離甲狀腺激素（FT4）酶聯(lián)免疫分析 試劑盒使用說明書 本試劑僅供研究使用 目的：本試劑盒用于測定小鼠血清,，血漿及相關液體樣本中游離甲狀腺激素（FT4）的含量,。 實驗原理： 本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠游離甲狀腺激素（FT4）水平。用純化的小鼠甲狀腺激素（FT4）抗體包被微孔板,，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入甲狀腺激素（FT4）再與HRP標記的甲狀腺激素（FT4）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,，經過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的游離甲狀腺激素（FT4）呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠游離甲狀腺激素（FT4）濃度,。 操作步驟： 1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔,，在*、第二孔中分別加標準品100μl,，然后在*,、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻,；然后從*孔,、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三,、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,，再各取50μl分別加到第五,、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,，混勻,；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七,、第八孔中,，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九,、第十孔中,，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉,。（稀釋后各孔加樣量都為50μl,，濃度分別為12pmol/L，8pmol/L ,，4pmol/L,，2pmol/L， 1pmol/L）,。 2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）、待測樣品孔,。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻。 3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。 4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用,。 5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去,，如此重復5次,，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl,，空白孔除外,。 7. 溫育：操作同3。 8. 洗滌：操作同5。 9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應（此時藍色立轉黃色）,。 11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行,。 |
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