標本要求
1．標本采集后盡早進行提取,，提取按相關文獻進行,，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存,，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
牛呼吸綜合癥病毒抗體Elisa試劑盒操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
16pg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
8pg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
4pg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
2pg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1pg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）,、標準孔、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）,。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去,，如此重復5次,，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl,，空白孔除外,。
7. 溫育：操作同3,。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應（此時藍色立轉黃色）,。
11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行,。
牛呼吸綜合癥病毒抗體Elisa試劑盒操作程序總結：
1.準備試劑，樣品和標準品
2.加入準備好的樣品和標準品,，37℃反應30分鐘
3.洗板5次,，加入酶標試劑，37℃反應30分鐘
4.洗板5次,，加入顯色液A,、B，37℃反應10分鐘
5.加入終止液
6.15分鐘之內度OD值
7.計算
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