樣品收集、處理及保存方法:
1,、 血清……操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,。使用不含熱原
和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血紅
細(xì)胞迅速小心地分離,。
2、 血漿……EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3,、 細(xì)胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4,、 組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,取上清液,。
5,、 保存……如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,,避免反復(fù)冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,,檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
操作注意事項(xiàng):
● 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
● 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
● 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
● 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,,避免使用帶金屬部分的加樣器,。
● 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
● 底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
● 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。
● 按照說明書中標(biāo)明的時間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
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