臺(tái)盼藍(lán)染色液使用說明書
貨號(hào):C0040
規(guī)格:50ml,、100ml
保存:4℃保存,一年有效,。
產(chǎn)品簡介:
臺(tái)盼藍(lán)(Trypan Blue)或稱臺(tái)盼蘭、錐蟲藍(lán),,是細(xì)胞活性染料,,常用于檢測細(xì)胞膜的完整性與細(xì)胞的存活率,是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一,。 正常的活細(xì)胞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整,,能夠排斥臺(tái)盼藍(lán),細(xì)胞不會(huì)被染成藍(lán)色,;而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞可被臺(tái)盼藍(lán)染成藍(lán)色,。通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失,即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡,。
臺(tái)盼藍(lán)可被巨噬細(xì)胞吞噬,,故可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。凋亡小體也有臺(tái)盼藍(lán)拒染現(xiàn)象,。臺(tái)盼藍(lán)染色后,,通過顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù),就可以對細(xì)胞存活率進(jìn)行比較的定量,。
染色時(shí)間只需 3-5 分鐘,,操作簡單。
使用說明:
1. 收集細(xì)胞:
用胰酶和/或 EDTA 消化貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞可直接收集,。收集的細(xì)胞時(shí)用 1000-2000 rpm 離心 1 分鐘,,棄上清,制備單細(xì)胞懸液,,并做適當(dāng)稀釋,。
2. 臺(tái)盼藍(lán)染色:
細(xì)胞懸液與 0.4%臺(tái)盼藍(lán)溶液以 9:1 比例混勻(終濃度 0.04%),染色 3 分鐘 ( 染色 3 分鐘時(shí)間已經(jīng)足夠,,但染色時(shí)間可以更長一些,,但不宜超過 10 分鐘) 。
3. 細(xì)胞計(jì)數(shù):
吸取少量經(jīng)過染色的細(xì)胞,,用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。死細(xì)胞著藍(lán)色并膨大,無光澤,;活細(xì)胞不著色并保持正常形態(tài),,有光澤。通常要比較地進(jìn)行定量,,每個(gè)細(xì)胞樣品少數(shù) 500 個(gè)細(xì)胞,。
細(xì)胞存活率(%)= 活細(xì)胞總數(shù)/(活細(xì)胞總數(shù)+死細(xì)胞總數(shù))×100%
注意事項(xiàng):
1. 染色時(shí)間不能太長,否則活細(xì)胞也會(huì)逐漸積累染料而染成顏色,,使檢測結(jié)果偏低,;
2. 有潛在致癌危險(xiǎn),為了您的安全和健康,,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。
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M1020 MTT 細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒
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北京索萊寶科技有限公司 | 下載次數(shù) |
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