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檢測范圍：                                                          96T

0.2 nmol/L - 6nmol/L

使用目的：

本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中丙二醛（MDA）含量,。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠丙二醛（MDA）水平,。用純化的大鼠丙二醛（MDA）抗體包被微孔板，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入丙二醛（MDA）,，再與HRP標記的丙二醛（MDA）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的丙二醛（MDA）呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠丙二醛（MDA）濃度,。

試劑盒組成

標本要求

1．標本采集后盡早進行提取,，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品,，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。

操作步驟

1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）、標準孔,、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）,。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,。
2. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 
3. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
4. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去,，如此重復5次,，拍干。
5. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl,，空白孔除外,。
6. 溫育：操作同3。
7. 洗滌：操作同5,。
8. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.
9. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
10. 測定：以空白空調(diào)零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

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