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為此，盛瀚科研人員圍繞“離子色譜在制藥行業(yè)中的應用”進行了一系列實驗測定,，希望制藥行業(yè)或行業(yè)外的工作人員對離子色譜的應用有更多參考和了解,。

·離子色譜在原料藥及其相關(guān)制劑中的應用

原料藥，指用于生產(chǎn)各類制劑的原料,，是制劑中的有效成份,，由化學合成、植物提取或者生物技術(shù)所制備的各種用來作為藥用的粉末,、結(jié)晶,、浸膏等。原料只有加工成藥物制劑,，才能成為供臨床使用的藥物,，因此原料藥質(zhì)量好壞決定制劑質(zhì)量的好壞。

世界各國對于其廣泛應用的原料藥及其相關(guān)制劑都制定了嚴格的國家藥典標準和質(zhì)量控制方法,，以加強藥物中有毒成分的控制,，加強對藥物雜質(zhì)的定性定量研究，進一步完善藥物與有效性相關(guān)的質(zhì)量控制要求,。

4.中藥材中二氧化硫的測定

硫磺熏蒸或浸泡是中藥材,、飲片的傳統(tǒng)養(yǎng)護方法，它能使中藥材,、飲片外觀光鮮,，即使水分嚴重超標也不會霉變。但這種加工方法會導致中藥材原藥殘留大量的二氧化硫,，對人體健康有一定的影響,。2020版藥典規(guī)定了酸堿滴定法、氣相色譜法,、離子色譜法用于檢測中藥材中二氧化硫,。其中離子色譜法需使用水蒸氣蒸餾法提取中藥材中二氧化硫，將其轉(zhuǎn)化為亞硫酸根,，進一步被雙氧水氧化為硫酸根后進行分析測定,。

l 分析柱：SH-G-1+SH-AC-4            

l 流動相：2.0 mM Na₂CO₃+8.0 mM NaHCO₃

l 流速：1.3 mL/min

l 柱溫：35℃                  

l 抑制器：SHY-A-6

l 進樣體積：25 μL

l 前處理：稱取5~10 g供試品粗粉（準確記錄質(zhì)量，精確至0.0001 g）,，置于水蒸氣蒸餾裝置蒸餾,，吸收液過0.22 μm濾膜進樣分析。

圖1  中藥材中二氧化硫(SO₄^2-)譜圖

5. 達肝素鈉中亞硝酸根和硫酸根離子的測定

達肝素鈉為豬黏膜的低分量肝素鈉,，平均分子量4000～6000,，為新一代抗血栓形成藥，具有明顯的抗血栓形成功能,，尤其抗凝血第Ⅹa因子的功能很強,，但抗凝作用微弱，抗凝血酶作用極微弱,。達肝素鈉是由普通肝素解聚或經(jīng)酶作用而獲得,，具有普通肝素所不具備的優(yōu)點。近年的研究結(jié)果表明,，其療效高于普通肝素,，具有使用方便，相對安全等優(yōu)點,，可在院外使用,。達肝素鈉常存在游離的亞硝酸根和硫酸根離子，可用離子色譜法進行定性定量分析。

（1）達肝素鈉中亞硝酸根離子

l 分析柱：SH-G-1+SH-AC-3            

l 流動相：166 mM NaAc（磷酸調(diào)節(jié)pH至4.3）

l 流速：1.0 mL/min

l 柱溫：室溫                    

l 檢測方式：直流安培法

l 施加電壓：1.0 V

l 進樣體積：100 μL

l 前處理：準確稱取固體樣品80 mg,，加純凈水定容至10 mL,，過0.22 μm濾膜進樣分析。

圖1  達肝素鈉中亞硝酸根離子譜圖

（2）達肝素鈉中硫酸根離子

l 分析柱：SH-G-1+SH-AC-3            

l 流動相：2.0 mM Na₂CO₃+8.0 mM NaHCO₃

l 流速：1.0 mL/min

l 柱溫：35℃                    

l 抑制器：SHY-A-6

l 進樣體積：25 μL

圖2  達肝素鈉中硫酸根離子譜圖

6. 硫酸軟骨素中硫酸根離子的測定

硫酸軟骨素（CS）,，是共價連接在蛋白質(zhì)上形成蛋白聚糖的一類糖胺聚糖,。在醫(yī)學上主要是作為治療關(guān)節(jié)疾病的藥品，與氨基葡萄糖配合使用,，具有止痛,，促進軟骨再生的功效，可以從*關(guān)節(jié)問題,。硫酸軟骨素廣泛分布于動物組織的細胞外基質(zhì)和細胞表面,，糖鏈由交替的葡萄糖醛酸和N-乙酰半乳糖胺聚合而成，通過一個似糖鏈接區(qū)連接到核心蛋白的絲氨酸殘基上,。雖然多糖的主鏈結(jié)構(gòu)并不復雜,，但硫酸化程度、硫酸基多少是決定其活性大小的極為重要的指標,。因此檢測硫酸軟骨素中硫酸根離子的含量,，對于活性研究和臨床應用重要的意義。

l 分析柱：SH-G-1+SH-AC-4            

l 流動相：2.0 mM Na₂CO₃+8.0 mM NaHCO₃

l 流速：1.3 mL/min

l 柱溫：35℃                    

l 抑制器：SHY-A-6

l 進樣體積：25 μL

l 前處理：樣品過0.22 μm一次性針頭過濾器進樣分析,。

圖1  硫酸軟骨素中硫酸根離子譜圖

7. 伊班膦酸鈉中亞磷酸根和磷酸根離子的測定

伊班膦酸鈉（IB）,，化學名稱為1-羥基-3-(N-甲基-N-戊胺基)亞丙基雙膦酸單鈉鹽一水合物。IB屬于第三代雙膦酸類藥物,，用于治療惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移,、預防骨轉(zhuǎn)移及乳腺癌骨轉(zhuǎn)移后骨骼事件的發(fā)生，并可預防和治療骨質(zhì)疏松癥,，是目前適應癥*的雙膦酸鹽藥物,，具有高效、低毒和使用方便等優(yōu)點,。

隨著IB臨床應用的增多,，有必要建立便捷、靈敏的檢測方法,，為藥品質(zhì)量檢測提供技術(shù)支持,。磷酸根和亞磷酸根作為伊班膦酸鈉注射液中的有關(guān)物質(zhì)，分析方法主要有容量分析法,、分光光度法,、高效液相色譜-示差折光檢測法、離子色譜法等,。通常情況下,，容量分析和分光光度法易受制劑中輔料干擾,，現(xiàn)已較少應用；示差折光檢測法對離子態(tài)物質(zhì)靈敏度低,，受流動相組成的波動影響較大,，不適合梯度洗脫；離子色譜法因其準確,、快速,、選擇性好,，可同時分離多組分物質(zhì)等優(yōu)點被廣泛應用,。

l 分析柱：Ion Pac AG11-HC+AS11-HC            

l 流動相：KOH梯度洗脫

              0-5 min，16 mM KOH,；

              5-7 min,，16-25 mM KOH；

              7-17 min,，25 mM KOH,；

              17-20 min，25-45 mM KOH,；

              20-23 min,，45 mM KOH；

              23.1-28 min,，25 mM KOH,；

              28.1-39 min，16 mM KOH,。

l 流速：1.0 mL/min

l 柱溫：35℃                    

l 抑制器：SHY-A-6

l 進樣體積：20 μL

l 前處理：

儲備液：分別準確稱取0.1048 g亞磷酸,、0.1123 g伊班膦酸鈉，加超純水稀釋定容至100 mL,，配制得PO₃^3-,、伊班膦酸1000 mg/L儲備液。

供試品：取伊班膦酸注射液5 mL,，稀釋定容至10 mL,。

對照品：分別取100 μL PO₃^3-、250 μL PO₄^3-,、500μL伊班膦酸儲備液(1000 mg/L),，用超純水稀釋定容至100 mL，配制得1 mg/L PO₃^3-,、2.5 mg/L PO₄^3-,、5 mg/L伊班膦酸對照品溶液。

圖1 對照品譜圖

圖2 供試品譜圖

• CIC-D120離子色譜儀

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