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為此,，盛瀚科研人員圍繞“離子色譜在制藥行業(yè)中的應(yīng)用”進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn)測定,，希望制藥行業(yè)或行業(yè)外的工作人員對(duì)離子色譜的應(yīng)用有更多參考和了解。

·離子色譜在原料藥及其相關(guān)制劑中的應(yīng)用

原料藥,，指用于生產(chǎn)各類制劑的原料,，是制劑中的有效成份，由化學(xué)合成,、植物提取或者生物技術(shù)所制備的各種用來作為藥用的粉末,、結(jié)晶、浸膏等,。原料只有加工成藥物制劑,，才能成為供臨床使用的藥物，因此原料藥質(zhì)量好壞決定制劑質(zhì)量的好壞,。

世界各國對(duì)于其廣泛應(yīng)用的原料藥及其相關(guān)制劑都制定了嚴(yán)格的國家藥典標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)量控制方法,，以加強(qiáng)藥物中有毒成分的控制，加強(qiáng)對(duì)藥物雜質(zhì)的定性定量研究,，進(jìn)一步完善藥物與有效性相關(guān)的質(zhì)量控制要求,。

4.中藥材中二氧化硫的測定

硫磺熏蒸或浸泡是中藥材、飲片的傳統(tǒng)養(yǎng)護(hù)方法,，它能使中藥材,、飲片外觀光鮮，即使水分嚴(yán)重超標(biāo)也不會(huì)霉變,。但這種加工方法會(huì)導(dǎo)致中藥材原藥殘留大量的二氧化硫,，對(duì)人體健康有一定的影響。2020版藥典規(guī)定了酸堿滴定法,、氣相色譜法,、離子色譜法用于檢測中藥材中二氧化硫。其中離子色譜法需使用水蒸氣蒸餾法提取中藥材中二氧化硫,，將其轉(zhuǎn)化為亞硫酸根,，進(jìn)一步被雙氧水氧化為硫酸根后進(jìn)行分析測定。

l 分析柱：SH-G-1+SH-AC-4            

l 流動(dòng)相：2.0 mM Na₂CO₃+8.0 mM NaHCO₃

l 流速：1.3 mL/min

l 柱溫：35℃                  

l 抑制器：SHY-A-6

l 進(jìn)樣體積：25 μL

l 前處理：稱取5~10 g供試品粗粉（準(zhǔn)確記錄質(zhì)量,，精確至0.0001 g）,，置于水蒸氣蒸餾裝置蒸餾，吸收液過0.22 μm濾膜進(jìn)樣分析,。

圖1  中藥材中二氧化硫(SO₄^2-)譜圖

5. 達(dá)肝素鈉中亞硝酸根和硫酸根離子的測定

達(dá)肝素鈉為豬黏膜的低分量肝素鈉,，平均分子量4000～6000，為新一代抗血栓形成藥,，具有明顯的抗血栓形成功能,，尤其抗凝血第Ⅹa因子的功能很強(qiáng)，但抗凝作用微弱,，抗凝血酶作用極微弱,。達(dá)肝素鈉是由普通肝素解聚或經(jīng)酶作用而獲得,，具有普通肝素所不具備的優(yōu)點(diǎn)。近年的研究結(jié)果表明,，其療效高于普通肝素,，具有使用方便，相對(duì)安全等優(yōu)點(diǎn),，可在院外使用,。達(dá)肝素鈉常存在游離的亞硝酸根和硫酸根離子，可用離子色譜法進(jìn)行定性定量分析,。

（1）達(dá)肝素鈉中亞硝酸根離子

l 分析柱：SH-G-1+SH-AC-3            

l 流動(dòng)相：166 mM NaAc（磷酸調(diào)節(jié)pH至4.3）

l 流速：1.0 mL/min

l 柱溫：室溫                    

l 檢測方式：直流安培法

l 施加電壓：1.0 V

l 進(jìn)樣體積：100 μL

l 前處理：準(zhǔn)確稱取固體樣品80 mg,，加純凈水定容至10 mL，過0.22 μm濾膜進(jìn)樣分析,。

圖1  達(dá)肝素鈉中亞硝酸根離子譜圖

（2）達(dá)肝素鈉中硫酸根離子

l 分析柱：SH-G-1+SH-AC-3            

l 流動(dòng)相：2.0 mM Na₂CO₃+8.0 mM NaHCO₃

l 流速：1.0 mL/min

l 柱溫：35℃                    

l 抑制器：SHY-A-6

l 進(jìn)樣體積：25 μL

圖2  達(dá)肝素鈉中硫酸根離子譜圖

6. 硫酸軟骨素中硫酸根離子的測定

硫酸軟骨素（CS）,，是共價(jià)連接在蛋白質(zhì)上形成蛋白聚糖的一類糖胺聚糖。在醫(yī)學(xué)上主要是作為治療關(guān)節(jié)疾病的藥品,，與氨基葡萄糖配合使用,，具有止痛，促進(jìn)軟骨再生的功效,，可以從*關(guān)節(jié)問題,。硫酸軟骨素廣泛分布于動(dòng)物組織的細(xì)胞外基質(zhì)和細(xì)胞表面，糖鏈由交替的葡萄糖醛酸和N-乙酰半乳糖胺聚合而成,，通過一個(gè)似糖鏈接區(qū)連接到核心蛋白的絲氨酸殘基上,。雖然多糖的主鏈結(jié)構(gòu)并不復(fù)雜，但硫酸化程度,、硫酸基多少是決定其活性大小的極為重要的指標(biāo),。因此檢測硫酸軟骨素中硫酸根離子的含量，對(duì)于活性研究和臨床應(yīng)用重要的意義,。

l 分析柱：SH-G-1+SH-AC-4            

l 流動(dòng)相：2.0 mM Na₂CO₃+8.0 mM NaHCO₃

l 流速：1.3 mL/min

l 柱溫：35℃                    

l 抑制器：SHY-A-6

l 進(jìn)樣體積：25 μL

l 前處理：樣品過0.22 μm一次性針頭過濾器進(jìn)樣分析,。

圖1  硫酸軟骨素中硫酸根離子譜圖

7. 伊班膦酸鈉中亞磷酸根和磷酸根離子的測定

伊班膦酸鈉（IB），化學(xué)名稱為1-羥基-3-(N-甲基-N-戊胺基)亞丙基雙膦酸單鈉鹽一水合物,。IB屬于第三代雙膦酸類藥物,，用于治療惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移、預(yù)防骨轉(zhuǎn)移及乳腺癌骨轉(zhuǎn)移后骨骼事件的發(fā)生,，并可預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松癥,，是目前適應(yīng)癥*的雙膦酸鹽藥物，具有高效,、低毒和使用方便等優(yōu)點(diǎn)。

隨著IB臨床應(yīng)用的增多,，有必要建立便捷,、靈敏的檢測方法,，為藥品質(zhì)量檢測提供技術(shù)支持。磷酸根和亞磷酸根作為伊班膦酸鈉注射液中的有關(guān)物質(zhì),，分析方法主要有容量分析法,、分光光度法、高效液相色譜-示差折光檢測法,、離子色譜法等,。通常情況下，容量分析和分光光度法易受制劑中輔料干擾,，現(xiàn)已較少應(yīng)用,；示差折光檢測法對(duì)離子態(tài)物質(zhì)靈敏度低，受流動(dòng)相組成的波動(dòng)影響較大,，不適合梯度洗脫,；離子色譜法因其準(zhǔn)確、快速,、選擇性好,，可同時(shí)分離多組分物質(zhì)等優(yōu)點(diǎn)被廣泛應(yīng)用。

l 分析柱：Ion Pac AG11-HC+AS11-HC            

l 流動(dòng)相：KOH梯度洗脫

              0-5 min,，16 mM KOH,；

              5-7 min，16-25 mM KOH,；

              7-17 min,，25 mM KOH；

              17-20 min,，25-45 mM KOH,；

              20-23 min，45 mM KOH,；

              23.1-28 min,，25 mM KOH；

              28.1-39 min,，16 mM KOH,。

l 流速：1.0 mL/min

l 柱溫：35℃                    

l 抑制器：SHY-A-6

l 進(jìn)樣體積：20 μL

l 前處理：

儲(chǔ)備液：分別準(zhǔn)確稱取0.1048 g亞磷酸、0.1123 g伊班膦酸鈉,，加超純水稀釋定容至100 mL,，配制得PO₃^3-、伊班膦酸1000 mg/L儲(chǔ)備液,。

供試品：取伊班膦酸注射液5 mL,，稀釋定容至10 mL。

對(duì)照品：分別取100 μL PO₃^3-,、250 μL PO₄^3-,、500μL伊班膦酸儲(chǔ)備液(1000 mg/L),，用超純水稀釋定容至100 mL，配制得1 mg/L PO₃^3-,、2.5 mg/L PO₄^3-,、5 mg/L伊班膦酸對(duì)照品溶液。

圖1 對(duì)照品譜圖

圖2 供試品譜圖

• CIC-D120離子色譜儀

  檢測儀器在線詢價(jià)